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目的：探究肿瘤患者自身因素对CIK、NK细胞体外扩增能力的影响并检测其对肿瘤细胞的杀伤活性,为CIK、NK细胞在恶性肿瘤治疗中的应用进一步提供理论依据。方法：第一部分：对既往于我科行CIK和NK自体细胞免疫治疗的恶性肿瘤患者进行回顾性分析,探讨患者年龄、性别、疾病种类、分期以及淋巴细胞亚群分布对CIK和NK细胞体外扩增能力的影响。在培养过程中每天计数细胞的数量,在培养前后分别应用倒置显微镜观察细胞的形态变化、应用流式细胞仪检测CD3+CD56+的CIK细胞以及CD3-CD56+NK细胞比例的变化情况。在培养的第14天收获细胞。第二部分：在培养的第7和第14天收获细胞,应用ELISA试剂盒检测CIK、NK细胞培养体系上清液中细胞因子IFN-γ的分泌水平。MTT法和Calcein-AM/PI荧光染色法检测CIK、NK细胞对K562细胞株的杀伤活性。结果：1.肿瘤患者CIK、NK细胞的扩增能力低于正常人,但与年龄、性别、疾病种类无关。而疾病分期、淋巴细胞亚群分布等是影响CIK、NK细胞体外扩增能力的因素；Ⅲ-Ⅳ期患者CIK、NK细胞的扩增比例低于Ⅰ-Ⅱ期患者。而诱导后NK细胞的比例与诱导前NK细胞的比例呈正相关,与诱导前CD8+细胞的比例呈负相关。2.经过14 d的体外培养后CIK细胞的比例由2.03±0.17%升至30.78±15.29%,NK细胞的比例由11.32±3.42%升至58.32±10.13%,低于正常人外周血来源的CIK、NK细胞的扩增比例,细胞因子IFN-γ分泌水平分别升至10.0±0.44pg/mL、14.76±0.42pg/mL,均低于正常人CIK、NK细胞的分泌水平。3.诱导前肿瘤患者和正常人PBMC细胞的杀伤活性在各个效靶比时无差异,而诱导后CIK、NK细胞的杀伤活性较培养前PBMC细胞显著增强,随着效靶比的增加,CIK、NK细胞对K562细胞株的杀伤活性逐渐增强,尤以CIK联合NK细胞的杀伤活性最强,在效靶比为25：1时可高达80%。结论：肿瘤患者CIK、NK细胞的体外扩增比例低于正常人,而与自身年龄、性别、疾病种类无关,但与疾病分期、淋巴细胞亚群分布相关。而诱导前患者外周血中NK细胞及CD8+细胞的比例与NK细胞的体外扩增能具有一定的相关性；可以通过体外诱导扩增获得大量的CIK、NK细胞,细胞因子IFN-γ的分泌水平及K562细胞株的杀伤活性显著增强,而CIK联合NK细胞的杀伤活性最强,可作为一种新型的过继免疫效应细胞应用于临床治疗恶性肿瘤。