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一直以来油井井筒结蜡都是影响油田正常生产的主要问题,具有十分严重的危害性。微生物清防蜡技术具有的许多突出的优点:施工方法简单,作用周期较长,操作费用较低,并且不影响油的品质,对地层不会造成任何污染等。本文从大庆采油三厂采出原油中筛选出能够以石蜡作为唯一碳源的2株菌株,分别命名为W1、W2。经过生理、生化实验及16S rDNA基因序列比对分析,鉴定得出W1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis KC492497),W2为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus KC679984)。石蜡降解菌室内性能评价结果表明:采用重量法分析微生物对石蜡的降解率,降解第21天菌株W1、W2及混合菌对分散石蜡的降解率分别为36%、31%、42%,对蜡块的降解率分别为21%、15%、24%;采用氧化铝吸附法测定原油中沥青质、蜡和胶质含量,菌株W1、W2及混合菌对沥青质含量的降低率分别为16%、13%、27%,对蜡含量的降低率分别为17%、15%、26%,对胶质含量的降低率分别为16%、13%、26%;菌株W1、W2及混合菌作用于原油后降粘率最高可达38%、37%、43%,凝固点均可最大降低3℃;通过气相色谱分析原油组分含量的变化,经过菌株W1、W2及混合菌作用后的油样,Pr/Ph降低率分别为28%、8%、6%,同时C28+C29/C21+C22降低率分别为40%、72%、72%。分别考查了混合菌的氮源、磷源、pH值、降解时间、温度、矿化度、接种量、活化次数等单一因素对降解石蜡的影响,结果表明:原油为碳源,NaNO3作为氮源,K2HPO4-KH2PO4作为磷源,初始pH值为6.5-7.5,降解时间为21天,温度为40℃-45℃,矿化度在4000-5000mg·L-1,接种量为4%,菌株活化4次,混合菌对石蜡的降解率较高。在此基础上通过正交实验得出混合菌降解石蜡的最佳工艺条件为:以NaNO3作为氮源,以K2HP04为磷源,pH为7,最佳降解时间为21天,培养温度为45℃,矿化度为5000 mg·L-1,接种量为4%,活化次数为5次。方差分析表明,氮源、降解时间是影响石蜡降解率的主要因素。按照混合菌降解石蜡的最佳条件做追加实验得出石蜡降解率最高达到53.6%。采用玉米秸秆作为发酵培养基,通过对秸秆的预处理、脱毒,制备成固体菌剂。