目的:细胞死亡是脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)后继发性脑损伤的重要病理机制。程序性坏死是新近发现的一种细胞死亡形式,在包括ICH在内的多种疾病中起着重要作用。先前的研究表明,ICH后有大量的神经元发生程序性坏死。然而,迄今为止尚未报道ICH后程序性坏死是否出现于小胶质细胞。褪黑素是一种主要在松果体中合成和分泌的激素,在各类中枢神经系统疾病中被证明具有神经保护作用,此外,褪黑素亦被报道可以抑制细胞程序性坏死。本研究旨在探寻ICH后小胶质细胞发生程序性坏死的情况和机制以及验证褪黑素能否抑制该过程从而在ICH中减轻继发性脑损伤。方法:本研究分为体内及体外实验两部分。利用C57小鼠构建了实验性ICH模型,通过神经功能评分及脑水含量检测验证褪黑素在ICH后不同的时间点发挥的神经保护作用。通过免疫荧光染色和蛋白印迹等方法在体内实验中检验小胶质细胞发生程序性坏死的情况以及褪黑素发挥作用的可能机制。利用氧化血红蛋白在体外模拟ICH的病理过程,采用细胞活性试验、细胞毒性试验、ROS试验以及流式细胞分析等技术进一步验证。在体外采用JC-1检测细胞线粒体膜电位的改变。结果:褪黑素在ICH后可减轻脑水肿,改善小鼠的神经和运动功能。ICH后小胶质细胞程序性坏死相关分子RIP1,RIP3和MLKL蛋白的表达显著增加,褪黑素可降低上述蛋白的表达从而抑制小胶质细胞程序性坏死。体外试验中,褪黑素可显著改善OxyHb造成的细胞活性下降,线粒体损伤。此外,ICH后,小胶质细胞中去泛素化酶A20(也称为TNFAIP3)的表达升高,我们发现褪黑激素可通过调节A20的表达进而抑制小胶质细胞程序性坏死从而发挥治疗作用。结论:本研究证明了小胶质细胞程序性坏死在ICH发病过程中的作用,更重要的是,褪黑素首次被证明可以参与调节A20,这为将来的研究开辟了新的切入点。