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目的:突触囊泡的包装、储存和神经递质释放与突触素(SYN)和小泡相关膜蛋白-2(VAMP-2)有着重要关系。二者在耳蜗发育过程中起着重要作用。本实验拟通过研究不同鼠龄大鼠耳蜗内SYN、VAMP-2的差异表达,探讨二者表达与听觉功能发育成熟的关系。
方法:选取出生后1天(P1)、5天(P5)、10天(P10)、14天(P14)及28天(P28)健康Sprague-Dawley大鼠各5只,行耳蜗冰冻切片,运用免疫荧光的方法,观察各组间SYN、VAMP-2表达分布的差异。
结果:大鼠出生后,其耳蜗形态发育尚不成熟,P1和P5组大鼠耳蜗Kolliker器还未退化,耳蜗的Corti器、Kolliker器均未发现SYN表达。P10组耳蜗Corti器结构基本成形,其顶周也未发现SYN表达,但在耳蜗底周和蜗管中部SYN的分布呈现特异性定位,内螺旋束和外螺旋束出现了较弱的点状表达。P14组耳蜗Corti器结构形态接近成熟,底周至顶周蜗管的内螺旋束和外螺旋束均出现簇状表达,较P10组强烈,且在Deiters细胞内侧缘出现点状表达,从内向外表达逐渐减弱。P28组中,SYN在内螺旋束呈星点状表达,在外螺旋束呈杯盏状表达,在五组中表达最为强烈。隧道螺旋束与内螺旋束相连处、内侧的Deiters细胞内侧缘也可见SYN的较弱表达。大鼠螺旋神经元(SGN)在发育成熟过程中数目有所减少,各组神经元胞浆内均有SYN广泛均匀表达,且随鼠龄增长在胞浆中的表达逐渐增强。VAMP-2在P1、P5组和P10组顶周大鼠耳蜗Corti器、Kolliker器中均未发现特异性表达。在P10组底周和蜗管中部、P14与P28组大鼠耳蜗中Corti器的表达部位与SYN基本一致。在P14和P28组内毛细胞顶部的胞浆可见星点状表达。各组SGN胞浆中均有VAMP-2广泛均匀表达。
结论:SYN和VAMP-2与耳蜗神经纤维的定位分布和神经生物活动存在紧密联系。二者在大鼠耳蜗发育过程中的表达存在差异,它们在不同鼠龄的表达变化与既往研究显示的耳蜗神经纤维发育过程基本一致。这种差异有利于神经末梢和靶细胞间构型建立,以及在听觉系统发育中对听觉信息编码的正确形成起着关键作用。