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目的围生期窒息引起的缺氧缺血性脑损伤（HIBD），常危及新生儿生命，是导致儿童神经系统伤残的常见原因之一。近年研究发现，促红细胞生成素（EPO）在新生儿HIBD发病机制中起重要作用。本实验通过制备新生大鼠HIBD模型，腹腔注射外源性重组人促红细胞生成素（rhEPO），观察不同剂量EPO对新生HIBD大鼠脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响，探讨EPO神经保护作用的分子机制，以期为临床治疗新生儿HIBD提供有效的方法和途径。方法1．制备HIBD模型：将新生7日龄Wistar大鼠行颈部正中切口，分离结扎左侧颈总动脉后给予低氧（8％O2，92％N2）处理2小时，制成HIBD模型。观察缺氧时动物行为变化，并于光镜下观察脑组织病理改变。2．行为能力检查：分别于手术前及缺氧后1小时对每只大鼠进行翻身能力、夹尾左旋测试。3．Bcl-2及Bax蛋白表达测定：42只新生7日龄Wistar大鼠随机分为假手术组、HIBD组、生理盐水对照组、EPO干预组，其中EPO干预组又分为大、中小、剂量三组，每组7只动物，于缺氧结束后立即一次性腹腔注射给药，应用免疫组织化学染色方法，观察给药24小时后Bcl-2及Bax蛋白表达变化。结果1．行为能力检查术前每只大鼠均做翻身能力、夹尾左旋测定，42只全部正常。缺氧后1小时假手术组测定结果同前。经历缺氧缺血的35只大鼠，19只不能翻身，28只出现夹尾左旋，13只表现不能翻身和夹尾左旋同时存在。2．HE染色及光镜检查结果假手术组：脑组织结构及细胞层次清楚，神经元形态正常，无脑水肿。HIBD组；脑组织水肿明显，神经元排列紊乱，胞体皱缩，胞质深染，核浓缩，结构不清，伴有胶质细胞增生。3．Bcl-2蛋白表达检测结果Bcl-2蛋白在假手术组中存在低水平表达，HIBD后表达明显增高，EPO干预组较生理盐水对照组及HIBD组更高。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义（P＞0.05）。其余各组间比较均有显著性差异（P＜0.05）。4．Bax蛋白表达检测结果Bax蛋白在假手术组中表达微弱，HIBD后表达明显增高，EPO干预组较生理盐水对照组及HIBD组表达降低。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义（P＞0.05）。其余各组间比较均有显著性差异（P＜0.05）。5．Bcl-2与Bax比值的变化Bcl-2／Bax在脑组织缺氧缺血性损伤后降低，EPO干预后又升高。生理盐水对照组与HIBD组相比，EPO大、中、小剂量三组两两相比差异无统计学意义（P＞0.05）。其余各组间比较均有显著性差异（P＜0.05）。结论1．通过对缺氧缺血后动物行为能力观察及脑组织病理学检查，证实新生鼠HIBD模型制作成功。2．EPO通过上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达，下调促凋亡蛋白Bax表达，改变Bcl-2／Bax，抑制脑细胞凋亡起到神经保护作用，为EPO临床治疗新生儿HIBD提供了更深层次的理论依据。