东亚飞蝗体温调节能力及其与绿僵菌致病性的关系研究

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在应用微生物治蝗方面,常会遇到在室内测试效果很好,田间防治效果却不理想,如致死速度慢,死亡率低,对有的蝗虫防效很差或不稳定等。近几年的研究发现,主要的原因之一就是与蝗虫的体温调节行为密切相关。体温升高,提高虫体免疫能力的同时,也限制了绿僵菌孢子萌发和生长,本文即对绿僵菌LA菌株在不同温度处理下的生物学特性,东亚飞蝗的体温调节能力、体温调节对东亚飞蝗感染绿僵菌后致病性的影响做了全面研究,以期明确体温调节在东亚飞蝗与绿僵菌互作间的作用,为提高绿僵菌对东亚飞蝗的防治效果奠定基础。主要研究结果如下:绿僵菌LA菌株在30℃下孢子萌发速率最快,对东亚飞蝗的致死速率也是30℃下最快;38℃下培养,孢子萌发率开始受到限制,40℃下培养孢子的萌发率接近于0;高温处理转至适温培养,对孢子萌发速率产生一定影响,48℃下处理不同时间,孢子萌发速率、萌发率均显著降低,转至30℃下培养24h仅有10.6%-20.9%的孢子可萌发;LA孢外蛋白酶活力培养至第6天达到最高,为31.37 U/ml,不同温度下活力测定表明37℃下孢外蛋白酶活力最高,几丁质酶在培养至第5天酶活力达到最高,为34.62 U/ml,最高酶活温度为50℃。东亚飞蝗具有较强的耐高温能力,环境温度(Ta)为44℃时,5龄若虫LT50、LT90最高,分别为112.5h和326.4h;50℃下,4龄若虫LT50、LT90最高,分别为11.4h和20.6h;无辐射热源条件下Ta<32℃时,蝗虫体温(Tb)高于环境温度,Ta>32℃时,蝗虫体温低于环境温度;当Ta分别以0.5℃/min、1.0℃/min、1.5℃/min和2.0℃/min速率升高时,Tb随之升高并出现体温波动现象,成虫较若虫死亡所用时间长,相应的虫体死亡时对应的Ta和Tb也较其它龄期高,表现出较强的抗高温能力;有辐射热源条件下,东亚飞蝗倾向于选择温度高但不至于对其造成伤害的温度层;同一辐射热源下,直射蝗虫体温升高最快,辐射角度越大,体温升高速率越慢,升温幅度越低;风力在有辐射热的条件下对蝗虫体温有一定影响,风级越大,蝗虫体温降低幅度越大,而无辐射热源条件下,风力对蝗虫体温影响不大。体温调节对染菌蝗虫的死亡时间、死亡率、对热源的选择行为以及成虫繁殖力等均有一定影响。接种后当天给与辐射热量和第3d天给与辐射热量,LT50最高可差3.6d,LT90最高可差7.1d;接种后每天辐射9h和3h,LT50最高可差3.5d,LT90最高可差6.6d;与健康蝗虫相比,染菌蝗虫更喜欢选择温度较高的位置;染菌后,东亚飞蝗雌成虫成熟速率较对照快,产卵量在前期高于对照,后期低于对照且卵的孵化率显著低于对照;有体温调节的条件下,接种相等剂量LA孢子的蝗虫死亡时间显著长于无体温调节的个体。天津北大港蝗区气候条件适合东亚飞蝗的发生,3-5龄若虫和成虫阴晴天气平均体温差分别为2.7℃、3.7℃、4.8℃和4.2℃;田间笼罩对蝗虫体温影响不大;喷洒绿僵菌不同剂型后,东亚飞蝗的体温高于对照,但是接种不同剂型LA,蝗虫之间体温差异不明显。体温调节对东亚飞蝗血淋巴的细胞免疫和体液免疫均有一定影响,注射绿僵菌分生孢子后无体温调节(INT)东亚飞蝗的血细胞浓度最低下降至2.2×107个/ml,有体温调节(IT)的蝗虫血细胞浓度最高上升至8.1×107个/ml;在不接种LA的蝗虫体内,注射硅珠后4h和24h,有体温调节的蝗虫(CT)血细胞吞噬能力高于无体温调节(CNT)的蝗虫,而至72h时,有体温调节和无体温调节蝗虫血细胞吞噬能力无明显差异;注射LA孢子后24h被吞入硅珠的比率INT、IT、CNT和CT无显著性差异,但是96h后INT未被吞噬硅珠比率达89.0%,第10天INT无个体存活,而有体温调节的虫体第10天吞入硅珠比对照还高;注射LA孢子后CT和CNT条件下酚氧化酶PO活力基本稳定,IT和INT的PO活力随注射后时间先递增后递减,IT酶活力增加明显,至第7天升至最高,至注射后第9天,INT己无存活个体,IT的酶活力也开始下降。
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