论文部分内容阅读
创伤性颅脑损伤(Traumatic Brain Injury,TBI)是一种常见的神经外科疾病,具有很高的死亡率。幸存者大多数也存在极高的伤残度,常表现出运动功能丧失、认知功能障碍等症状,给个人、家庭及社会均造成沉重精神和经济负担。遗憾的是,目前对TBI的病理机制及分子机理的研究并不深入,临床上也缺乏有效的治疗手段和方法。研究表明,神经调节素1(Neuregulin 1,NRG1)通过与其特异性受体Erb B4结合,激活中间神经元上受体酪氨酸激酶活性及胞内下游相关信号通路,抑制兴奋性神经元活动,从而抑制脑缺血等疾病诱导的神经元凋亡。但NRG1-Erb B4信号通路是否也对TBI后神经元的损伤具有保护作用,尚未见报道。本课题中,我们采用国际通用方法,采取标准化作业,建立稳定可靠的TBI动物模型,检测致伤区域Erb B4、NRG1和p Erb B4蛋白表达水平;运用免疫组化等方法,检测致伤区域神经元和胶质细胞的数量变化;对比Erb B4特异敲除的小鼠和野生型小鼠在接受TBI处理后的存活率和康复状况;比较Erb B4特异敲除的小鼠和野生型小鼠在接受TBI处理后的致伤区域组织坏死面积和水肿等病理变化;对谷氨酸诱导损伤的原代皮层神经元施加NRG1和Erb B4胞外段,运用CCK-8细胞活力检测方法检测细胞的死亡率;运用药理学方法,在对谷氨酸诱导损伤的原代皮层神经元施加NRG1和Erb B4胞外段,同时施加GABA能受体的拮抗剂或激动剂,运用CCK-8细胞活力检测方法检测细胞死亡率。实验结果如下:1.TBI导致致伤区域Erb B4蛋白表达下降,NRG1和p Erb B4表达上升,神经元数量减少,星型胶质细胞和小胶质细胞增多。2.特异性敲除Erb B4小鼠经TBI处理后,其死亡率显著高于野生型小鼠,行为康复效果也比野生型小鼠差。3.特异性敲除Erb B4小鼠经TBI处理后,其致伤区域组织坏死面积显著大于野生型小鼠,水肿也显著更严重,星型胶质细胞和小胶质细胞显著多于野生型。4.NRG1-Erb B4对谷氨酸盐诱导的神经元损伤具有保护作用,这种保护作用可被GABA受体拮抗剂阻断;但GABA受体激动剂与NRG1-Erb B4信号没有协同效应。以上结果提示,NRG1-Erb B4信号对TBI导致的神经元损伤具有保护作用。NRG1-Erb B4信号对神经元损伤的保护机制有可能是通过促进GABA释放来实现的。