【摘 要】
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脂肪及脂肪干细胞在整形外科临床的应用范围越来越广泛,包括各种脂肪填充治疗,创面修复治疗,干细胞疗法等。然而,我们对它的特性并不完全透彻。目的:研究皮下脂肪与髌下脂肪垫来源的干细胞在分化与增殖等方面的差异。进一步通过高通量的转录组测序(RNA-seq)和蛋白组学,从基因表达谱和蛋白合成谱的角度去分析它们的差异与它们来源的关系。在前面的基础上,研究脱细胞细胞外基质对脂肪干细胞的促进作用,探讨两者结合的
【基金项目】
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国家自然科学基金(81301337、81272019);
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脂肪及脂肪干细胞在整形外科临床的应用范围越来越广泛,包括各种脂肪填充治疗,创面修复治疗,干细胞疗法等。然而,我们对它的特性并不完全透彻。目的:研究皮下脂肪与髌下脂肪垫来源的干细胞在分化与增殖等方面的差异。进一步通过高通量的转录组测序(RNA-seq)和蛋白组学,从基因表达谱和蛋白合成谱的角度去分析它们的差异与它们来源的关系。在前面的基础上,研究脱细胞细胞外基质对脂肪干细胞的促进作用,探讨两者结合的应用价值。方法:通过供体匹配的方法获取兔皮下脂肪和髌下脂肪垫,酶消化法获得相应的脂肪干细胞。研究其增殖速度,表面标志表达的差别。研究成骨分化,成软骨分化,成脂肪分化能力的差别。获取脂肪干细胞的RNA,下一代测序获取其表达信息,分析差异表达基因。获取脂肪干细胞的蛋白,蛋白质组学得到其蛋白表达谱信息,分析差异蛋白的分布及特征。获取人皮下脂肪干细胞,体外用脂肪干细胞在培养皿表面包被脱细胞细胞外基质,再将脂肪干细胞分别种植于普通培养皿和基质包被后的培养皿,研究细胞外基质对脂肪干细胞增殖能力和分化潜能的影响。结果:皮下脂肪来源的干细胞在增殖和成脂分化方面有优势,髌下脂肪垫来源的干细胞在成软骨方面有显著优势,两者在成骨分化方向没有显著差异。RNA-seq和蛋白质组学研究在基因和蛋白表达层面证明了髌下脂肪垫来源的干细胞天然地倾向于向成软骨方向分化,皮下脂肪来源干细胞则偏好成脂分化方向,并解释了后者增殖速度快的机制。脱细胞细胞外基质能够显著促进脂肪干细胞的增殖能力,并促进其成脂和成软骨分化能力。结论:髌下脂肪垫和皮下脂肪来源的干细胞存在显著的差异,它们展现的功能与部位相适应。髌下脂肪垫来源的干细胞天然地倾向于向软骨方向分化。皮下脂肪来源干细胞则更容易向成脂方向分化,并且表现出明显的增殖优势。脱细胞细胞外基质培养可在较长培养时间内维持脂肪干细胞的增殖能力,并可以促进其分化潜能,是一种有效的体外脂肪干细胞培养方式。
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