论文部分内容阅读
创伤后应激障碍(Post-traumatic stress disorder,PTSD)是人们在遭遇重大应激事件后长期存在的精神障碍。影像学证据显示,PTSD患者海马体积减小,可能存在病理损害,但其究竟存在何种病理损害以及损害原因并不清楚,因为临床上并没有PTSD患者大脑的直接病理学证据。另外,Zn2+作为大脑中重要的信号分子,是否参与PTSD的发生尚未见报道。因此,通过动物实验来研究PTSD发生的特点、机制十分必要。我们在成功建立PTSD大鼠模型的基础上,观察PTSD大鼠大脑皮层及海马各区的病理变化,进一步检测海马中的Zn2+浓度、神经递质、受体等,初步探讨Zn2+在PTSD发展中的可能作用及机制。方法:(1)PTSD大鼠模型的建立。采用复合刺激方法建立此模型。(2)行为学检测。以正常大鼠为参照,利用旷场实验、高架十字迷宫和Morris水迷宫来检测正常组和模型组大鼠的行为学变化,通过比较一系列行为学指标来筛选出具有PTSD阳性症状的大鼠。(3)病理学研究。以正常大鼠为参照,对PTSD大鼠大脑皮层、海马CA1、CA2、CA3区和齿状回分别进行HE染色和Nissl染色,观察其病理变化特点。(4)Zn2+浓度检测。以正常大鼠为参照,利用锌离子检测试剂盒分别检测PTSD大鼠血液和海马中的Zn2+浓度。(5)生化指标检测。以正常大鼠为参照,利用ELISA试剂盒分别检测海马中的锌转运蛋白(Zn T3)、神经递质(Glu)、受体(GABA、NMDA)等。主要结果:1.行为学检测:(1)旷场实验:模型组大鼠和正常组比较,跨格次数和站立次数明显减少(P<0.01),提示前者的活动性及探索性降低;(2)高架十字迷宫:模型组大鼠和正常组比较,前者进入双臂次数明显减少(P<0.01),在闭臂停留时间百分比明显增多(P<0.01),提示模型组大鼠活动性降低、焦虑性增加;(3)Morris水迷宫空间探索实验:模型组大鼠和正常组比较,前者穿越平台次数及进入靶象限次数明显减少(P<0.01),提示模型组大鼠空间学习记忆能力受损。2.病理学研究:(1)正常组大鼠大脑皮层、海马CA1区、CA2区、CA3区及齿状回细胞形态规则、分布均匀,核仁清晰,胞浆尼氏体丰富,未见明显病理改变;(2)模型组大鼠大脑皮层细胞形态规则、分布均匀,未见明显病理改变;(3)模型组大鼠海马CA1区、CA3区细胞形态不规则,排列紊乱,可见细胞数量减少,细胞间隙增大,有较多空泡样的细胞病变,以CA3区更为明显;(4)模型组大鼠海马CA2区细胞排列较规则,分布较均匀;(5)模型组大鼠齿状回可见部分细胞排列疏松、细胞间隙增大、尼氏体数量减少。3.Zn2+浓度的检测:模型组大鼠血清中Zn2+浓度无明显改变而海马中游离Zn2+浓度降低。4.生化指标的检测:海马Zn T3转运蛋白浓度降低,而NMDA(NR2)受体、GABA-A受体、Glu浓度表达增高。结论:(1)采用复合应激方法成功建立了PTSD大鼠模型;(2)PTSD模型大鼠大脑皮层及海马CA2区无明显病理改变,而海马CA1区、CA3区和齿状回均有不同程度的病理改变;(3)PTSD模型大鼠海马受到不同程度的病理损害,且这种损害具有区域选择性,这可能是导致其空间学习记忆能力障碍的原因;(4)海马中游离Zn2+可能借助于Zn T3,通过NMDA(NR2)受体、GABA-A受体通道进入神经细胞内,继而导致海马损伤,引起空间记忆障碍和认知障碍。