人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是血液中最丰富的蛋白质,能够运输和储存大量的内源和外源物质,甚至是每一种小分子物质。近年来,通过如重组突变体和X-射线晶体学方法对HSA结合配体特性的研究,增加了对其结构和功能的认识,在蛋白质黏附水平尝试预测配体间的、配体与HSA的相互作用是有价值的。白蛋白的黏附作用,不仅能够增加黏附配体的血浆溶解度,降低其毒性,和/或保护其不被氧化。临床上,白蛋白作为药物载体正发挥着日益重要的作用,如肿瘤中白蛋白的积累促进了以白蛋白为载体的肿瘤靶向给药系统的形成;治疗性肽或蛋白与白蛋白共价或非共价结合提高自身的稳定性和半衰期。一些具有生物活性的蛋白质药物由于清除率高、半衰期短,使其治疗效果受到限制。一种普遍应用的改善方法便是将这种小分子多肽或蛋白质药物直接与血液中半衰期较长的一种分子相连来增大分子量从而降其清除率。人血清白蛋白因其独特的特性和生理功能成为理想的载体。基于亲和的黏附技术成为改善蛋白质药物特性的一种手段。噬菌体表面展示技术(Phage Display Technology,PDT)自1985年诞生至今,已经成功应用于随机多肽文库(Random Peptide Library)。白蛋白作为黏附载体的关键是获得特异性黏附肽,这就激发我们发展一种噬菌体展示筛选程序来更快速、更高效的筛选黏附肽。本文利用基于噬菌体滴度的噬菌体表面展示技术定量筛选HSA黏附肽,利用选择比作为筛选参数定量优化淘选过程,在传统的淘选策略基础上发展了降低靶分子浓度法,并对选择比较高的克隆进行DNA测序,得到特异性较高的HSA黏附肽序列。选择比是人血清白蛋白包被板与对照空白板上洗脱噬菌体量的比值。通过连续3轮淘洗后,利用选择比对人血清白蛋白特异性黏附肽进行初步筛选。挑取噬菌体单克隆进行特异性鉴定,成功的挑选出一些可以与HSA特异性结合的噬菌体阳性克隆,最终得到了 3个特异性黏附肽的序列。筛选出的3个特异性人血清白蛋白黏附肽没有同源序列,说明其黏附的可能是人血清白蛋白的不同部位。筛选出的小肽将作为药物标签,与HSA非共价黏附,延长蛋白质药物的半衰期,提高蛋白质药物的药代动力学性质。