【摘 要】
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谷胱甘肽是生物体内重要的小分子巯基化合物,具有清除有害自由基、重金属解毒等活性功能。筛选富含谷胱甘肽的生物样品作为人体外源性补充剂或利用其对重金属的超积累作用修
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谷胱甘肽是生物体内重要的小分子巯基化合物,具有清除有害自由基、重金属解毒等活性功能。筛选富含谷胱甘肽的生物样品作为人体外源性补充剂或利用其对重金属的超积累作用修复重金属污染,在防病、治病以及在绿色环保中具有重要意义。本研究改变了传统的提取方法,利用破壁与衍生化同步进行的提取方法,避免了细胞破壁后巯基的氧化变性。采用UV-Vis分光光度法利用5,5’-二硫硝基苯甲酸(5,5’-dithio-bis-nitrobenzoic acid, DTNB)作为衍生化试剂可以测定生物样品中小分子巯基化合物的总量。而且利用邻苯二甲醛(o-phthaladehyde,OPA)作为衍生化试剂可以选择性测定生物样品中GSH的含量。本研究采用标准加入法和标准曲线法分别测定了生物样品中GSH的含量,利用差减法计算出生物样品中半胱氨酸的含量。最后利用MALD-TOF质谱法对所测生物样品中的小分子巯基进行了定性分析。研究结果表明生物细胞中存在完整的谷胱甘肽及半胱氨酸分子。本研究对生物细胞内活性物质的准确分析提供了方法学上的依据。
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