同种异体颜面复合组织移植面神经再生的实验研究

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[目的]:1.建立兔面神经离断性损伤的实验动物模型,研究应用Bio-Gide可降解生物膜和自体静脉包绕吻合口及直接吻合三种修复方式对面神经再生的影响;2.建立兔、犬同种异体颜面复合组织移植的实验动物模型,观察移植后面神经的再生情况。[方法]:1.选取青紫蓝兔27只,随机分为单纯缝合组、自体静脉组和Bio-Gide生物膜组,每组9只。均建立面神经颊支离断性损伤的实验动物模型,自体静脉组和Bio-Gide生物膜组分别予自体静脉和Bio-Gide生物膜包绕神经缝合后的吻合口,单纯缝合组吻合口不作任何处理。术后4周,8周,12周分别行下列检查:肉眼观察局部神经吻合口情况;取神经吻合口处标本分别行HE染色光镜和透射电镜观察以及行神经肌电图检测,分析三组实验兔面神经的再生情况。2.选取日本大耳白兔16只,随机配对后分别作为供/受体,分为8组。建立兔同种异体颜面复合组织移植的实验动物模型,FK506与皮质激素联合应用作为免疫抑制治疗方案。术后第14天、28天和第40天取移植面神经吻合口处标本分别行HE染色光镜和透射电镜观察,术后28天、40天分别行神经肌电图检测,分析移植后兔面神经的再生情况。3.取杂种犬3只,解剖颅外段的面神经,研究其出颅后在面部的走行和分布。在此基础上选择面神经颊支作为移植神经,以2只Beagle犬分别作为供/受体,建立犬同种异体颜面复合组织移植的实验动物模型,术后60天、100天分别行神经肌电图检测,术后100天取移植神经吻合口标本分别行HE染色光镜和透射电镜观察,分析移植后犬面神经的再生情况。[结果]:1. 27例手术均获得成功,实验兔存活良好。三组实验兔的面神经均获得不同程度的再生。自体静脉组和Bio-Gide生物膜组无论是肉眼观察吻合口与周围组织粘连情况,还是光镜和电镜下观察再生神经纤维组织学特点、有无胶原纤维增生干扰和超微结构变化,以及神经动作电位的潜伏期和波幅等指标上,均明显优于单纯缝合组,差别有统计学意义。而自体静脉组和Bio-Gide生物膜组之间各项神经电生理指标差别无统计学意义。2.8例移植手术中,6例获得成功。移植后14天,神经纤维以变性改变为主,有少量神经纤维长入吻合口,但神经束排列紊乱。28天时移植神经的吻合口有较多的神经纤维长入,神经束排列较前规则,但形态仍欠正常,40天时再生神经纤维变得较前成熟,有髓神经的数量增多,但仍可见到变性的神经纤维。术后28天时未测得明显的神经动作电位,40天时测得的神经动作电位波形离散,表现为明显的传导阻滞。3.移植手术获得成功。术后60天神经肌电图检测指标潜伏期较正常明显延长,波幅明显减小,100天时潜伏期与波幅均较前明显恢复改善。术后100天神经吻合口的组织学结构接近正常。[结论]:1.应用Bio-Gide生物膜和自体静脉早期包绕神经吻合口,具有减轻神经吻合口与周围组织的粘连,阻止瘢痕组织长入及神经纤维瘤形成,促进神经组织再生的作用,但两者之间无明显差异。2.本实验建立的日本大耳白兔和Beagle犬的包含面神经的同种异体颜面复合组织移植动物模型具有可行性。其中兔适合作为中短期观察的动物模型,Beagle犬适合作为长期观察的动物模型。3.FK506的口服吸收率存在较大的个体差异,在动物实验中有效的血药浓度可能达到3 ng/ml以上即可。本实验采用的0.4mg/kg/d的起始剂量是安全有效的。4.同种异体颜面复合组织移植后面神经的再生是个极为缓慢的过程,需要经历一系列的病理生理过程。移植100天后神经吻合口可出现组织结构上接近正常,但要达到功能上的恢复尚需更长的时间。
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