【摘 要】
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植物WRKY转录因子参与调控植物生理过程且响应不同生物、非生物胁迫。本研究中,我们报道拟南芥转录因子WRKY28、WRKY63和WRKY75响应草酸胁迫,将30mmol/L草酸喷于拟南芥幼苗上
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植物WRKY转录因子参与调控植物生理过程且响应不同生物、非生物胁迫。本研究中,我们报道拟南芥转录因子WRKY28、WRKY63和WRKY75响应草酸胁迫,将30mmol/L草酸喷于拟南芥幼苗上,这三个基因均显著诱导表达。拟南芥中这三个基因的过表达突变体对草酸的抗性显著增强。草酸普遍被认为腐生病原菌核盘菌关键的致病因子。本研究中,核盘菌离、活体接种实验表明:这三个WRKY基因过表达突变体对核盘菌的抗性显著增强;此外,灰霉病菌喷雾接种实验证实WRKY28突变体相比野生型Co10对灰霉病菌的抗性增强。台盼蓝和DAB染色核盘菌接种24h拟南芥叶片,结果显示:WRKY63、WRKY75过表达突变体中氧爆发相比野生型Co10显著;另一方面侵染植物叶片的核盘菌菌丝在WRKY63、WRKY75过表达突变体中生长弯曲、紧密,相比之下,野生型Co10中核盘菌菌丝舒展。进一步,对核盘菌接种24h拟南芥进行PAL、POD、PPO三种酶活的测定;相比野生型Co10,WRY63、WRKY75过表达突变体中PAL无明显变化,POD上调,PPO下调。有意思的是,荧光定量PCR结果揭示WRKY28、WRKY75过表达突变体中JA途径标记基因PDF1.2均上调,而SA途径标记基因PR1在两个突变体中的表达模式不同,在WRKY28突变体中PR1上调,而WRKY75突变体中PRl下调。对这三个基因的进化树分析,我们发现拟南芥WRKY28、WRKY75与甘蓝型油菜中的BnWRKY28-1、 BnWRKY75-1具有很高的同源性。对这3个基因的功能分析可为甘蓝型油菜筛选核盘菌抗性突变体提供理论基础。
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