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第一部分EZH2和E-cadherin在肾细胞癌中的相关性及预后分析研究目的：检测肾细胞癌组织中EZH2和E-cadherin基因的表达,探讨其与肾癌临床病理特征间的关系和相关性,分析二者表达状况对肾癌预后的影响。方法：应用RT-PCR法和蛋白免疫印迹Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白在肾细胞癌组织中的表达情况,采用免疫组化法检测EZH2和E-cadherin蛋白在肾癌组织中的表达,分析EZH2和E-cadherin表达与肾癌临床病理特征间的关系及其二者表达间的相关性；同时应用Kaplan-Meier单因素和Cox比例风险模型多因素分析EZH2和E-cadherin表达状况与肾癌术后无瘤生存的关系。结果：EZH2 mRNA和蛋白在正常肾组织中均极低水平表达,其阳性表达率为16.67%,而在肾癌组织中表达水平明显升高,其阳性表达率为78.12%,同时EZH2蛋白阳性表达率随着肾细胞癌临床分期和病理分级的升高而明显增加,并且肾癌淋巴转移组EZH2蛋白阳性表达率明显高于肾癌无淋巴结转移组,其差异均具有统计学意义(P<0.05)。E-cadherin蛋白在正常肾组织中阳性表达率为75.0%,而在肾癌组织中阳性表达率为26.56%,同时E-cadherin蛋白阳性表达率随着肾细胞癌临床分期和病理分级的升高而呈明显降低趋势,并且肾癌淋巴转移组E-cadherin蛋白表达水平明显低于肾癌无淋巴结转移组,其表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。肾癌组织中EZH2蛋白的表达与E-cadherin蛋白的表达呈负相关。生存分析结果显示,EZH2蛋白阳性表达的患者术后平均无瘤生存时间明显较短,且无瘤生存率较低；而E-cadherin蛋白阳性表达的患者术后平均无瘤生存时间明显较长,且无瘤生存率更高；单因素分析表明EZH2和E-cadherin表达为影响肾癌预后的相关因素,但多因素分析发现EZH2和E-cadherin并非肾癌预后的独立影响因素。结论：EZH2和E-cadherin异常表达与肾癌发生和临床进展关系密切；EZH2和E-cadherin是影响肾癌预后的相关因素,但并非肾癌预后的独立影响因素,因此,尚需进一步研究鉴定EZH2和E-cadherin作为肾癌预后风险因子的确切价值。第二部分RNA干扰沉默EZH2基因表达对肾癌细胞增殖和凋亡的影响目的：检测EZH2 mRNA和蛋白在肾癌细胞系786-0和ACHN中的表达,并研究RNA干扰靶向沉默EZH2基因表达对ACHN肾癌细胞株增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法：应用RT-PCR法和蛋白免疫印迹Western blot法分别检测EZH2 mRNA和蛋白在人正常近端肾小管上皮细胞株HK-2和肾癌细胞株786-0和ACHN中的表达情况。脂质体法介导化学合成的EZH2 siRNA瞬时转染ACHN细胞株,Western blot法检测转染后ACHN细胞EZH2基因表达的沉默效果,CCK-8法检测转染后ACHN细胞增殖率,流式细胞术检测转染后ACHN细胞周期和凋亡情况。结果：人正常近端肾小管上皮细胞HK-2中EZH2mRNA的表达量极低,而肾癌细胞株786-0和ACHN中EZH2mRNA的表达水平明显升高,与进一步的蛋白免疫印迹检测结果相一致。RNAi靶向干扰EZH2基因可成功地敲减ACHN细胞EZH2蛋白的表达。CCK-8法检测结果显示：siEZH2实验组ACHN细胞生长明显受抑制,在转染后48h和72h细胞增殖受抑制效应最显著(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示：siEZH2转染组ACHN细胞周期中G1期细胞比例呈增加趋势,而S期和G2期细胞比例呈减少趋势,其中在转染后48h G1期ACHN细胞比例显著增加,而S期和G2期细胞比例明显下降;进一步的凋亡检测结果显示：siEZH2转染组ACHN细胞凋亡率随转染后时间的延长而呈增加趋势,在转染后48h和72h细胞凋亡率增加最显著(P<0.05)。结果表明沉默EZH2基因表达可靶向肾癌ACHN细胞周期中G1/S限制点而阻滞细胞周期进展,同时可有效抑制肾癌细胞增殖和促进细胞凋亡。结论：EZH2基因沉默能有效抑制肾癌ACHN细胞增殖,使细胞发生G1/S期阻滞,并可促进肾癌细胞的凋亡,因此靶向EZH2沉默其表达有望成为肾癌基因治疗的新策略。