前列腺癌是男性泌尿生殖道常见的恶性肿瘤之一，其发病率近年来呈上升趋势，此外导致该类患者死亡的最主要原因是其引起的转移性疾病。前列腺癌最容易发生淋巴结转移、骨转移和肺转移，在这一转移过程中基质金属蛋白酶(MMPs)起了重要的作用。细胞外基质(ECM)是由纤维蛋白和蛋白多糖组成的复杂的三维网状结构，ECM对于许多生理过程是必需的，如组织的发育、生长和修复。肿瘤细胞周围ECM的降解对于肿瘤细胞的侵袭和转移是必不可少的步骤之一。MMPs为锌依赖性肽链内切酶家族，包含至少24种蛋白酶，可以降解ECM中所有成分，MMP-2属于其家族一员。研究表明MMPs不仅通过降解ECM在肿瘤侵袭过程中发挥重要作用，而且在肿瘤生长和血管形成过程中都发挥着重要的作用，MMPs的表达与多种恶性肿瘤的不良预后密切相关，针对MMPs的抗肿瘤治疗日益受到重视。强力霉素(Doxy)是一种四环素类抗生素，研究发现它可以抑制MMPs的活性，减少肿瘤的侵袭和转移。为明确MMP-2在前列腺癌细胞系PC-3侵袭过程中所起的作用及强力霉素对前列腺癌细胞PC-3增殖、侵袭行为及MMP-2活性的影响，本论文进行了以下几个方面的研究，相应实验结果如下： — ————— 一 1．形态学研究：倒置显微镜下观察活细胞形态变化，不同浓度的DOXy 作用于PC－3细胞后，肿瘤细胞发生皱缩，山原来的梭形、多边形变为不规 则形，且易脱壁，而且此效应与作用时间及药物浓度成下相关。 2．DOXy对细胞增殖能力的影响：DOXy对ic列腺癌细胞系PC－3增殖 的抑制作用具有时间、剂量依赖性。 3．DOXy对细胞粘附性的影响：DOXy作用后的PC－3细胞粘附性的改 变表现为用药组在各不同的时间段内粘附能力明显低于来用药组。 4．DOXy对细胞MMPZ表达的影响：细胞免疫组织化学染色法证实 MMP士在6i列腺癌细胞系 PC刁中有较强的表达，DOXy可以抑制 MMP2 在前列腺癌细胞PC－3中的表达。 5．透射电镜观察结果：DOXy对前列腺癌细胞系PC上的作用主要是选 择性地作用于前列腺癌细胞的线粒体，引起线粒体肿胀受损，细胞能量代 谢障碍，这可能是DOXy抑制PC上细胞生长的作用机制之一。 6．Doxy对细胞周期的影响：流式细胞仪检测Doxy作用后的前列腺癌 细胞系 PC－3，细胞周期被阻滞在 GI期，S期比例明显下降，说明 DNA合 成减少，而且此效应具有剂量依赖性；同时并没有检测到凋亡峰，说明DOXy 抑制前列腺癌细胞系PC－3的增殖可能并不是通过诱导凋亡而产生作用。 7．DOXy对MMP2分泌的影响：明胶底物 SDS－PAGE凝胶电泳显示 PCS细胞仅分泌无活性的 MMP2，不同浓度组u·L“’和 10mg·L‘） 的DOXy均可抑制MMPZ的分泌。 吕．体外侵袭试验结果显示：对照组每200倍视野穿过的细胞数平均为 （82．04土4．62），而 5 mg·L’、10 mg·L＊和 20 mg·L＊Doxy作用组作用 2天后，每 200倍视野穿过的细胞数分别为（26．l土3．56）、（7．17士2．ZI） 和凹．25士0．74L分别与对照组相比差异显著…＜0刀1＊该试验表明DOXy 对PC－3细胞的侵袭有抑制作用，且具有剂量依赖性。 4另四窜医大学囚士学位放文一 结论：MMP上在iiJ列腺癌细胞系 PC上中有较高的表达，DOXy不仅可以抑制PC－3细胞的增殖、MMPH的表达、分泌，同时也可以抑制肿瘤细胞的粘附、侵袭与转移，而且均具有剂量依赖性，有望成为减少前列腺癌手术后复发及转移的药物。