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目的:通过BALB/c小鼠腓肠肌部位注射促甲状腺素受体（thyrotropin receptor,TSHR）膜外区A亚单位重组质粒pcDNA3.1/TSHR268,构建Graves病（Graves disease,GD）小鼠模型,特别是观测其Graves眼病（Graves ophthalmopathy,GO）的发生特点,探讨GD伴GO BALB/c小鼠模型的疾病特征。方法:1、大量制备本实验室保存的TSHR膜外区A亚单位重组质粒pcDNA3.1/TSHR268,并进行聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）鉴定。2、实验小鼠随机分为三组,造模组在BALB/c小鼠双侧腓肠肌各注射50μg/50μL质粒,立即在注射部位电穿孔以增强转染免疫效果,对照组注射50μL无菌生理盐水并电穿孔,空白组注射50μL无菌生理盐水。分别在第1、4、7、10周对小鼠进行免疫。3、分别在第0、3、6、9、12、15、18周取小鼠内眦静脉血检测血清甲状腺素（thyroxine,T4）、促甲状腺素（thyroid stimulating hormone,TSH）、促甲状腺素受体刺激性抗体（thyrotropin receptor stimulating antibody,TSAb）、促甲状腺素受体阻断性抗体（thyrotropin receptor stimulating blocking antibody,TSBAb）。4、第12周对小鼠行99mTcO4-显像及CT平扫,评估GD伴GO小鼠模型甲状腺摄取功能和眼部变化情况。5、第18周处死小鼠,取甲状腺和眼球组织,测量甲状腺大小、眼球直径,通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色评估甲状腺和眼眶组织的病理变化。结果:1、造模组第2次免疫后,小鼠血清T4由10.37±5.11 ng/mL升高至27.44±9.36ng/mL,明显高于对照组和空白组（P<0.01）,并在第12周达到峰值,此后稍有下降,直至18周仍高于其它两组（P<0.01）;造模组血清TSH明显下降,从免疫前的2.74±0.58μIU/mL下降至第2次免疫后的1.88±0.65μIU/mL（P<0.01）,此后持续下降;造模组血清TSAb从免疫前的3.11±1.32μIU/mL上升至98.46±13.12μIU/mL,TSBAb从免疫前的5.06±2.71μIU/mL上升至11.04±4.22μIU/mL,造模组TSAb、TSBAb均显著高于对照组和空白组（P<0.01）,并在第12周达到峰值,此后稍有下降,直至18周仍有明显差异。2、经4次免疫后,GD模型组小鼠甲状腺99mTcO4-摄取能力明显高于对照组和空白组。高分辨小动物CT扫描可见部分GD模型小鼠较正常BALB/c小鼠眼外肌增粗,呈梭形肿胀,肌腱及肌附着点未见异常。各组间眼球直径未见明显差异。3、GD模型组小鼠甲状腺大体外观比对照组体积增大、饱满。甲状腺组织HE染色显示GD模型组小鼠甲状腺内有大量淋巴细胞浸润,甲状腺滤泡胶质稀薄、颜色变浅,部分滤泡细胞增生、肥大,可见乳头状折叠突起,符合GD病理表现。对照组和空白组甲状腺组织未见上述病理变化。4、GD模型组部分小鼠眼部HE染色示眼外肌和球后组织淋巴细胞浸润、透明质酸增多、脂肪细胞浸润,眼外肌增粗,符合GO的病理表现。结论:通过多次给予BALB/c小鼠肌肉注射并电穿孔转染TSHR膜外区A亚单位重组质粒pcDNA3.1/TSHR268,可成功构建BALB/c小鼠GD模型,部分小鼠可发生GO病变。