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背景:胃癌是常见的恶性肿瘤。我国胃癌患者的年死亡率在各种恶性肿瘤中居首位;而许多患者即使在行根治术后仍死于复发,这是由于肿瘤发生了微转移。微转移(micrometastasis)是指在各种机体组织、体液及细胞移植物中检测到的镜下的肿瘤残留,是用常规临床病理学方法不能检出的、隐匿在原发灶以外组织的转移。目前研究认为,临床转移一般都是由微转移发展而来。近年来,组织化学和分子生物学技术的迅速发展使得微转移领域也有了较快的发展;随着免疫组化和逆转录—聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法的发展和应用,胃癌微转移的检出成为可能,微转移检测领域也日益受到重视。进展期胃癌根治术后最常见的复发为腹膜转移。目前国内外对于腹膜微转移的检测有较多报道,其中腹腔冲洗液细胞学检查方法(peritoneal lavage cytology,PLC)是检测腹腔内脱落的癌细胞(exfoliated cancer cells,ECC)的常用方法,成为预测腹膜微转移的重要手段,但其缺点是对微量癌细胞检测敏感性低,阳性率仅为14%～21%,有较高的漏诊率。目的:本研究通过胃癌手术中自横结肠系膜等处取活检,用免疫组化的方法检测细胞角蛋白(cytokeratin,CK)中的CK19及CK20,研究胃癌患者腹膜微转移情况;通过研究腹膜微转移与胃癌部位、肿瘤分期、淋巴结转移等的关系,探讨微转移发生的因素和微转移的规律,从而更好地指导临床分期,为判断预后及建立个体化的术后治疗方案提供更可靠的依据。材料与方法:研究对象:选取2007年6月至2007年10月,在山东大学齐鲁医院普外科接受手术治疗的胃癌患者30例,其中男性21例,女性9例,年龄38—73岁。方法:1.术中取材:术中以生理盐水分别冲洗腹腔及网膜囊,吸出收集,术后行PLC以对照。自横结肠系膜取活检,约黄豆粒大小,术后行免疫组化检测CK19及CK20。常规清扫淋巴结并分组,与胃癌切除标本一起送检。2.免疫组化:组织块以10%福尔马林固定,石蜡包埋。每只蜡块均连续切片4张,厚度为4μm,其中两张用于HE染色,一张用于CK19染色,一张用于CK20染色。所用CK19、CK20单克隆抗体,PV9000试剂盒及DAB显色剂均购自北京中杉公司。3.结果判定:CK表达于上皮细胞,阳性反应物质定位于胞质,呈现棕黄色。HE染色阴性,而CK19或CK20阳性者,视为发生了微转移。4.统计学分析:用SPSS10.0统计软件进行数据分析。CK19、CK20与PLC的差异及腹膜微转移与肿瘤浸润深度、淋巴结转移的关系均用X~2检验,P＜0.05为差异有统计学意义。结果1.HE染色:30个活检组织块的HE染色均为阴性。这说明所取组织均无常规检查方法可发现的转移,若免疫组化染色为阳性,可认为发生了微转移。2.免疫组化方法与腹腔冲洗液细胞学检查的比较:经免疫组化染色,CK19、CK20阳性者分别为13例及9例,阳性率分别为43.3%和30.0%,PLC阳性为3例,阳性率为10.0%。经统计分析,CK19、CK20的阳性率均与PLC阳性率之间有统计学差异。3.胃癌是否侵出浆膜与微转移的关系:在所研究30例胃癌患者中,突破浆膜层者共9例,其中8例检测到微转移(即CK19或CK20阳性者);未突破浆膜层者21例,有微转移者9例。经统计学分析,两组之间有统计学差异。结论1.与传统的PLC相比,CK19及CK20是检测胃癌微转移更灵敏的指标。2.肿瘤已侵出浆膜层者更易发生腹膜微转移。3.结果表明,虽然常规HE并不能发现,实际上已经有56.7%的胃癌患者发生了横结肠系膜的微转移。由此可以看出胃癌手术清扫横结肠系膜的重要性和必要性。