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[目的]建立原代髁突软骨细胞终末矿化诱导模型,模拟髁突软骨内成骨中软骨矿化过程并探索FLRT3与BMP信号通路之间的关系;建立加载静磁场的原代髁突软骨细胞矿化诱导模型,进一步探讨静磁场对FLRT3及软骨细胞终末矿化相关因子的影响,为研究静磁场对颌面部发育及改建的影响奠定理论基础。[方法]1.通过矿化诱导液建立髁突软骨细胞矿化诱导模型,茜素红染色观察软骨矿化结节形成,免疫荧光检测BMP2、Runx2在髁突软骨细胞中的表达定位,验证成骨矿化诱导模型的可靠性。2.免疫荧光检测FLRT3在髁突软骨细胞中的表达,Western blotting 观测 FLRT3、BMP2、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8 及Runx2等软骨细胞成熟相关蛋白表达趋势,分析FLRT3在软骨细胞分化不同阶段的表达特性及相互联系。3.通过对终末矿化诱导髁突软骨细胞细胞模型加载280mT静磁场,采用Western blotting检测静磁场影响成骨诱导d3、d8、d15后,FLRT3及软骨细胞晚期矿化相关蛋白BMP2、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Runx2的表达变化,探讨静磁场影响软骨细胞终末矿化的影响。[结果]1.加入成骨诱导液后茜素红染色观察到有钙结节的生成,软骨细胞内BMP2、Runx2表达增强,提示诱导液处理髁突软骨细胞后出现终末矿化,体外矿化诱导模型可靠。2.矿化诱导处理后发现FLRT3在软骨细胞中明显增强。d3 至 d8 BMP2、Smad1/5/8、p-Smad1/5/8、Runx2 表达逐渐降低,而 FLRT3 的表达则从d3至d8逐渐升高,但它们的蛋白表达均较对照组高;3.加载静磁场成骨诱导模型中BMP2、Smad1/5/8、Runx2蛋白表达d3至d8表达逐渐降低,FLRT3表达d3至d8逐渐升高,但它们的表达均较对照组高。[结论]1.终末分化诱导液处理髁突软骨细胞后,软骨细胞中与终末矿化相关的BMP信号通路被激活,促进了相关成熟矿化软骨细胞特异性因子的表达,一定程度上模拟了软骨细胞终末分化的过程;2.在终末矿化诱导过程中,FLRT3与BMP信号调控途径关系密切,提示两者协同调控颌面软骨的矿化成熟;3.静磁场通过FLRT3与BMP信号通路影响软骨细胞的矿化。