禽传染性支气管炎（Infectious bronchitis,IB）是由传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病。各种日龄各种类型的鸡均易感,在世界广泛流行,给家禽养殖业带来巨大的经济损伤。IBV主要感染呼吸道、泌尿生殖道和胃肠道。IB在实验室条件下症状较轻,但在生产中常会出现严重的症状甚至死亡,这往往和其它疾病如新城疫（Newcastle Disease,ND）、慢性呼吸道病（Chronic respiratory disease,CRD）、大肠杆菌病和沙门氏菌病等的存在有关。目前,主要通过接种疫苗来预防和控制IB。但IBV能通过基因突变和遗传重组,不断产生新的变异株。而疫苗对于不同血清型的IBV毒株之间的交叉保护免疫低,使得IBV的防控更加复杂。禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli,APEC）属于肠道外致病菌,可以引起胚胎死亡、脐炎、败血症、肉芽肿、卵黄性腹膜炎和全眼球炎等一系列病症,通常情况下不引起禽发病,但是当有其它病原如新城疫病毒（Newcastle Disease virus,NDV）传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus,IBDV）、IBV、支原体和球虫等存在以及营养不良等时,大肠杆菌易表现出它的致病性。评价IBV疫苗效果主要依据临床表现、病毒分离、纤毛停滞实验等。这些方法各有优缺点。本文拟先建立E.coli继发感染的攻毒模型,然后将其应用于IBV疫苗保护力的评价中,为IBV疫苗保护力的评价方法提供新的参考。本实验于2015-2017年在四川部分地区共分离鉴定禽大肠杆菌42株。其中35株能检测出血清型,定型率为83.33%（35/42）。主要血清型有O8和O18,占总定型菌株的54.29%。选取9个血清型的19株禽大肠杆菌进行雏鸡致病性实验,发现12株高致病性菌株,占总致病株的63.16%（12/19）;6株中致病性菌株,占总致病株的31.58%（6/19）;1株低致病性菌株,占总致病株的5.26%（1/19）。选取四川地区主要流行血清型的强致病性大肠杆菌菌株TQ0812株,确定其最佳感染剂量为2x10~7CFU。选取70只未免疫的普通青脚麻肉鸡70只,随机分为6个组A、B、C、D、E和F组,分别隔离饲养。34日龄时A和C组、B和D组分别气管接种1x10~5EID50、1x10~6EID50近年国内新出现的TC07-2型毒株ZQX株,E和F接种PBS,4天后C、D和E分别气管接种2x10~7CFU E.coli TQ0812株,F组不接种。通过对临床症状、病理解剖（心包炎和气管出血）和气管显微损伤来判定IBV前期感染对大肠杆菌继发感染病致病性的影响。结果显示D组鸡群的临床症状、心包炎、气囊炎和气管出血相比与其它组更严重。从临床症状来看,D组最严重,IBV攻毒2-3天出现呼吸道症状,包括打喷嚏、气管啰音等,攻大肠杆菌后呼吸道症状更严重。对心包炎病变而言,D组相较于C组更严重,存在显著性差异（P＜0.05）;对气管出血而言,各组气管均有不同程度的出血（D组＞C组＞B组＞A组＞E组）,D组与B组、A组、E组均有显著性差异（P＜0.05）,C组与A组、E组也存在显著性差异（P＜0.05）。综上所述,鸡气管接种1x10~6EID50IBV,4天后再气管接种2x10~7CFU APEC TQ0812菌株,可显著增强大肠杆菌继发感染的致病性,且对不同组织的病变而言,心包炎更能反应大肠杆菌继发感染所致的致病性的差异。为观察E.coli继发感染模型可否用于IBV疫苗保护效率的评估。选取1日龄青脚麻鸡96只,随机分成8组a～h,每组12只鸡,分别隔离饲养。在20日龄时a和c组用H120进行滴鼻免疫,b和d组用4/91进行滴鼻免疫,免疫剂量为1x10~5EID50;e,f,g和h组接种PBS。免疫14d后a,b,c,d,e和g组用TC07-2型毒株ZQX株对鸡进行攻毒。4天后c,d,e,f组再气管接种2x10~7CFU TQ0812菌株。通过临床症状、心包炎和气管出血严重程度来评价两株活疫苗对ZQX株的保护效果。结果显示,c组总体剖检病变比d组更严重,c组和d组心包炎存在显著性差异（P＜0.05）,4/91的保护效果高于H120。E.coli继发感染模型可用于H120和4/91疫苗株对ZQX株的保护率的评估。综上所述,O8和O18是四川地区禽致病性大肠杆菌的主要流行血清型。鸡气管接种IBV,4天后再气管接种大肠杆菌,可显著增强大肠杆菌继发感染的致病性。本实验建立的E.coli继发感染模型可为IBV疫苗保护率的评价提供新的参考。