精索静脉曲张大鼠睾丸HSP60、CREM表达的改变及与生精功能损害的相关性研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanshuang
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第一部分:精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能损害的病理学定量研究 目的:精索静脉曲张是导致男性不育的首位原因,在人类男性不育中,50%由精索静脉曲张引起,在生殖医学研究中引起了广泛关注,其睾丸病理改变表现为精子成熟障碍,精子质量下降,但缺少公认的定量指标,使许多研究缺少说服力,我们参照了Makler记分法,通过对大鼠精索静脉曲张睾丸曲细精管的定量分析,对精索静脉曲张所致的生精功能障碍作出科学的评价,从而有助于该病的诊治,促进男性不育症的进一步研究。 方法:从浙江省医学科学院动物中心购200-250g的成年S-D大鼠30 浙江大学博士学位论文-俞建军只,年龄约50士10天(青春期),随机分为(l)精索静脉曲张组(VG)20只,Q)假手术对照组旧oG)10只,按 Saypol方法部分结扎左肾静脉,同时结扎左骼总静脉与左精索内静脉之间的交通支,建立左精索静脉曲张模型,将两组动物在同一条件下饲养3个月进行观察。 术后3月,实验大鼠麻醉后开腹观察,用带目镜测微器的手术显微镜测量蔓状静脉与精索静脉之间的静脉直径,绝大多数动物精索内静脉呈不同程度的曲张,这种曲张呈双侧性,左侧直径为0.63士0刀3mm,右侧为0二36上0刀4mm,左侧明显粗于右侧,有显著差异(P<0刀5),对照组动物在手术前后双侧精索内静脉直径无任何差异,均为0.30士0刀3mm,模型制作成功。取出左、右侧睾丸,分别切成3块,用4%甲醛、4%多聚甲醛及二%戊二醛固定,用于兔疫组化、原位杂交及电镜。本组实验选择兔疫组化的标本,作 VG与 SOG的比较,每例标本镜下随机观察 10个曲细精管断面,分别测定曲细精管内径D,管周膜厚度M,管壁生殖细胞层数P,生殖细胞成熟程度S,每个项目按0-5分评分,满分为20分,然后从评分结果计算其平均得分 TMS(Testicular Makler Score人 结果:精索静脉曲张组的左侧睾丸与假手术组的左侧相比,曲细精管内径显著缩小(97.65士11.66。VS 143.56上10.72lllll),管周膜增厚(4.70士0.28urn vs 2刀4上0.25urn),细胞层次减少(2.23土0.58层 vs 5.36士0.59层),生殖细胞成熟障碍(3.43士 0.67分 vs 4.77士 0.47分),Makler评分显著低于假手术组门 * 土1l 分VS 13川 土1二0分),二者有非常显著性差异。 精索静脉曲张大鼠左侧晕丸(VGL)与右侧宰丸(VGR)的生精功能比较,其 D、M、P、S值分别为:97石5土门.66urn,4厂0士0二sum,2二3士0.58层,3.43土0石7分:右侧晕丸为门3.72士9.94_,3.47上0.22_,3.14士0.59层,4.04士0.45分。h者均有非常显著性差异。 2 浙江大学博士学位论文-俞建军 假手术组大鼠左侧睾丸(SOGL)与右侧宰丸(S。GR)的生精功能比较:D、M、P、S值分别为 143.56土 10.72 urn,2刀4士0.25 urn,5.36士0.59层,4.77士0.47分;144.90士 10.42 urn,二刀1上0.23 urn,5.13士0.54层,4.79士 0.43分,P值均大于 0刀5。静脉曲张组左、右侧睾丸生精功能均有损害,且以左侧为著,假手术组左、右侧睾丸生精功能无显著性差异。 结论: 1.精索静脉曲张大鼠睾丸病理学定量研究表明:VG的生精功能损害 表现为曲细精管内径缩小,管周膜增厚,细胞层次减少,生精细胞 成熟障碍,TMS分值降低。 2.Makler评分评价生精功能客观、真实、可靠,有一定推广价值。
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