抑郁症中糖皮质激素受体与调节性T细胞关联作用导致免疫失衡的研究

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目的1.研究抑郁症患者外周血CD4+CD25+Treg的数量及其特征性标志Foxp3的表达与糖皮质激素受体的表达之间的关系,探讨抑郁症中糖皮质激素受体与CD4+CD25+Treg的关联作用。2.探讨抑郁症患者外周血清中细胞因子IL-10、TGF-β的变化及它们在糖皮质激素受体与CD4+CD25+Treg关联导致免疫失衡中的作用。方法1.根据中国精神疾病诊断标准CCMD3、美国精神障碍诊断和统计手册(DSM-Ⅳ)诊断标准筛选临床抑郁患者。Zung氏抑郁自评量表(SDS)、Hamilton抑郁量表评定病情轻重程度。36例抑郁患者中轻度9例,中度12例,重度15例。与实验组相匹配的社区内正常样本36例,保证各组年龄、性别、应激因素方面差异无统计学意义。2.采用RT-PCR技术检测轻、中、重度抑郁以及正常对照组GRα、GRβ、Foxp3 mRNA表达水平。3.采用免疫磁珠技术从各组样本外周血单个核细胞中分离CD4+CD25+Treg并计数,计算其在CD4+T细胞中的比例。4.采用ELASA法测定各组样本血清中细胞因子IL-10、TGF-β的浓度。5.采用间接免疫荧光法同时标记CD4+CD25+Treg上的Foxp3与GR在激光共聚焦显微镜下直接观察Foxp3与GR在CD4+CD25+Treg上的共表达。6.对结果进行统计学分析,成组设计的多样本间均数的比较验证方差齐性后,使用方差分析及S-N-K两两比较。两指标间关系使用相关分析。结果1.抑郁组,尤其是重度抑郁患者外周血CD4+CD25+Treg数量(8.3±1.6×107/L)及在CD4+T细胞中的比例(3.01±0.69%)明显少于正常组(20.0±2.6×107/L,5.80±1.26%)。且随着抑郁程度的加重,该细胞数量及在CD4+T细胞中的比例减少。2.抑郁各组GRamRNA、Foxp3 mRNA表达水平均低于正常组,且随抑郁程度加重表达降低。但GRβmRNA在正常对照组,轻、中度抑郁组内几乎不表达,分别只有1例阳性结果,在重度抑郁组,有9例呈阳性表达。3.血清中IL-10、TGF-β浓度随抑郁程度加重而降低。4.激光共聚焦显微镜下观察CD4+CD25+Treg上GR与Foxp3共表达,发现GR表达于细胞胞浆及胞核中,Foxp3主要表达于细胞核中。与正常对照相比,重度抑郁患者CD4+CD25+Treg上GR与Foxp3表达显著减少。5.相关分析结果显示,Foxp3 mRNA与GRamRNA的表达,Foxp3mRNA的表达与CD4+CD25+Treg的数量及其在CD4+T细胞中的比例,GRαmRNA的表达与IL-10、TGF-β的浓度,Foxp3 mRNA的表达与IL-10、TGF-β浓度均存在正相关关系。结论1.抑郁症患者体内存在免疫激活,GR表达减少在该免疫失衡中起重要作用。2.抑郁症CD4+CD25+Treg的GR表达减少,是造成抑郁症免疫激活的重要原因之一。3.细胞因子IL-10、TGF-β是神经-内分泌-免疫网络中的重要组成部分。
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