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Pseudomonas pseudoalcaligenes A1(类产碱假单胞菌)是一株具有高汞抗性的海洋细菌,能在Hg2+浓度为120mg/L的海水培养基中生长,生物富集能力高达179.533mg/g。为了探究类产碱假单胞菌A1高抗汞性机制,对在Hg2+胁迫下生长的A11和无Hg2+胁迫下生长的A10进行转录组学分析。经基因注释后,进行GO和KEGG通路富集分析。注释结果显示所有能注释到NR,NT,KEGG,Swiss-Prot,COG和GO数据库的Unigene有2695个,除有21.5%的基因数是注释到其他物种基因外,大部分基因均能注释到假单胞菌属的基因中。Hg2+诱导下差异表达的基因共有427个,其中上调基因有262个,下调基因有165个。Unigene97-All和CL78.Contig1-All是表达差异倍数较大的两个与重金属抗性相关的基因。经BLAST比对发现,CL78.Contig1-All和Unigene97-All分别为heavy metal efflux pump CzcA和MerA汞还原酶编码基因。Czc A金属外排泵能将胞内的重金属排出体外,降低重金属对自身的毒害;Unigene97-All编码的氨基酸序列与广泛存在于抗汞微生物中的汞还原酶Mer A氨基酸序列存在很高的相似性,说明Unigene97-All编码的蛋白很可能是汞还原酶。为了验证Unigene97-All和CL78.Contig1-All基因能否表达Hg2+抗性蛋白,利用基因工程技术,将其克隆于pET-28a,并转到宿主细胞E.coli BL21(DE3)中表达,成功构建了U97和CL78重组菌。研究两株重组菌对Hg2+的抗性和对Hg2+富集,结果显示U97和CL78重组菌都具有一定的抗汞能力,分别能在Hg2+浓度为6mg/L和2mg/L的培养基中生长。U97和CL78对Hg2+的最大富集量分别为85.47mg/g、89.28mg/g,和对照组大肠杆菌的富集量(90.09mg/g)相比无明显差异,重组菌中的抗性基因并没有提高菌体的富集量。因此,细菌的富集量与其抗性并没有必然的联系。