黄曲霉菌中G蛋白α亚基GpaB功能的初步研究

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黄曲霉(Aspergillus flavus)是农作物和动物最重要的致病菌之一,黄曲霉产生的黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFs)是一种致癌真菌毒素,严重影响人类和动物的健康。G蛋白信号途径是一种细胞跨膜信号传导途径,它普遍存在于真核生物体中。相关文献证实该信号途径能感应并响应许多种不同的胞外信号刺激。G蛋白信号转导途径对丝状真菌的生长发育、繁殖、致病性和真菌毒素等次级代谢产物的合成具有重要的调控作用。通过对黄曲霉G蛋白α亚基GpaB(AFLA018540)的初步研究,我们发现这个基因能够对黄曲霉的生长、产孢、菌核、致病性、毒素合成以及抗逆性产生不同的影响。应用同源重组的原理构建基因敲除突变体△gpaB和互补菌株△gpaB-C。在实验中发现,与黄曲霉野生型菌株(WT)相比,缺失gpaB基因的黄曲霉突变体对黄曲霉菌的菌落生长无影响,而产孢量显著降低,产菌核量增加,对玉米的侵染能力减弱,毒素产量也显著减少。qRT-PCR实验表明在敲除突变体△gpaB中,产孢相关的基因abaA和brlA的表达量明显低于野生型,产毒相关的基因aflR,aflS和qflP的表达量明显低于野生型,产菌核相关的基因nscC,nscD和sclR的表达量高于野生型。通过模拟外界环境的刺激,发现△gpaB在细胞壁完整性胁迫和氧化胁迫实验中菌落生长的相对抑制率明显大于野生型,说明黄曲霉感应和响应细胞壁完整性和氧化胁迫需要GpaB的参与。本研究初步探索了黄曲霉中G蛋白α亚基GpaB对黄曲霉菌落生长、产孢、产菌核、产毒素以及致病性的影响,并且发现它也参与了响应外界环境刺激。本研究为进一步探索黄曲霉产毒机制提供了基础,同时也为黄曲霉的防控提供了新的思路和理论支持。
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