【摘 要】
：
背景:益生菌对炎症性肠病（IBD）具有有益的作用。高迁移率族蛋白1（HMGB1）是一种非常重要的炎性介质参与了IBD的发生发展。然而比较相同剂量的长双歧杆菌（Bif）及VSL#3?（VSL）对IBD的作用的研究尚未报道。目的:检测IBD患者粪便中HMGB1蛋白的水平以及比较相同剂量的长双歧杆菌及VSL#3?对TNBS所诱导的小鼠肠炎的影响及其机制研究。方法:1.运用ELISA方法检测IBD患者及其
论文部分内容阅读
背景:益生菌对炎症性肠病（IBD）具有有益的作用。高迁移率族蛋白1（HMGB1）是一种非常重要的炎性介质参与了IBD的发生发展。然而比较相同剂量的长双歧杆菌（Bif）及VSL#3?（VSL）对IBD的作用的研究尚未报道。目的:检测IBD患者粪便中HMGB1蛋白的水平以及比较相同剂量的长双歧杆菌及VSL#3?对TNBS所诱导的小鼠肠炎的影响及其机制研究。方法:1.运用ELISA方法检测IBD患者及其对照组粪便中HMGB1蛋白的水平。2.小鼠肠炎模型的建立及益生菌干预处理:运用2.5%TNBS灌肠诱导小鼠实验性肠炎,诱导当天为day 0,于3天前小鼠开始每天灌胃处理4*10~9 cfu长双歧杆菌或VSL#3?至day 3,总共7天。每天观察小鼠的一般情况,测量小鼠体重。于day 4牺牲小鼠收集标本检测。3.观察结肠的大体肉眼观,测量结肠长度。4.运用HE染色观察结肠组织病理学变化及评分。5.运用荧光定量Real-time PCR检测小鼠结肠组织中HMGB1的基因表达水平和小鼠结肠粪便中菌群基因的水平。6.运用ELISA方法检测小鼠血清,结肠粪便及RAW264.7细胞培养上清中HMGB1蛋白的水平。7.运用免疫组织化学染色检测小鼠结肠组织中HMGB1的含量及分布。8.运用流式细胞术检测小鼠结肠固有层单个核细胞（LPMC）中F4/80+细胞的百分比。9.运用Western blot检测小鼠结肠组织及Caco-2细胞总蛋白中紧密连接蛋白（ZO-1,occludin,claudin-1）的水平。10.检测Caco-2细胞单层的TEER变化百分比及FITC-dextran 4 kDa（FD4）的渗透性。结果:1.CD和UC患者粪便中HMGB1蛋白的水平明显升高。CD和UC疾病活动期患者粪便中HMGB1蛋白的水平都升高,其中UC疾病活动期患者尤为明显。2.结合一般情况及体重变化、结肠标本肉眼观、长度、组织病理学变化,TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎的模型建立成功。长双歧杆菌及VSL#3?能改善TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎的疾病程度。3.长双歧杆菌及VSL#3?能降低TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎中血清及粪便标本中HMGB1蛋白的水平,可能与抑制了小鼠肠组织上皮细胞和/或巨噬细胞中HMGB1的释放部分相关。4.长双歧杆菌及VSL#3?能升高TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎中结肠组织中紧密连接蛋白（ZO-1,occludin,claudin-1）的水平。5.长双歧杆菌及VSL#3?能改善TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎中结肠粪便中部分菌群的失衡。6.长双歧杆菌及VSL#3?能增高rHMGB1所诱导的Caco-2细胞单层的TEER变化百分比,降低rHMGB1所诱导的Caco-2细胞单层FD4的渗透性,增高rHMGB1所诱导的Caco-2细胞ZO-1蛋白的水平。结论:1.IBD疾病活动期患者及小鼠肠炎粪便中HMGB1蛋白水平都明显升高,可能与疾病炎症有关。2.相同剂量的长双歧杆菌及VSL#3?具有类似的缓解TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎的作用,以及降低小鼠实验性肠炎中HMGB1的水平和升高小鼠实验性肠炎中结肠紧密连接蛋白（ZO-1,occludin,claudin-1）的水平。3.结合体外实验的结果,长双歧杆菌及VSL#3?缓解TNBS所诱导的小鼠实验性肠炎的作用,可能通过抑制了HMGB1的释放和接下来的HMGB1所介导的肠道屏障功能失调。
其他文献
光纤宽频声波传感器在油气管道泄漏监测,高精度光声光谱检测,地震波监测和反潜监测等诸多民用和军事领域有着重大潜在应用。相比传统的电子式声波传感器,光纤声波传感器具有高灵敏,抗强电磁干扰,重量轻,体积小,耐腐蚀等不可替代的优势。本文基于光纤-薄膜的复合器件结构开展宽频声波传感研究,以实现高灵敏,高精度,快响应,超宽频和小尺寸的声波传感器为目标,设计了四种基于光纤-薄膜复合器件的宽频声波传感器,主要分为
单原子层厚的碳材料（石墨烯）的出现使得二维材料在近十几年来得到了广泛关注,磷烯、硅烯、金属氧化物、超薄二维金属及分子结构的研究丰富了二维材料在电子、光学、机械性能及医疗方面的应用价值。虽然二维结构的研究已经取得了长足进展,但是如何高效且可控的制备新型金属及有机分子二维纳米材料一直是个挑战。本论文通过在金（Au（111））表面构筑功能化的辛烷硫醇条状相分子模板,制备出两种不同类型的二维纳米结构:一、
有机硅对不同产品、工业及农业材料都有重要的作用,由于其优越的性能在商业上有着广泛的应用,从而通过人类活动进入环境和生态系统。一些有机硅化合物很难降解,能够长期存在于环境中。我们注意到,有机硅对环境中的植物、水生动物和微生物具有一定的毒性。近年来,稻虾共作模式广泛地应用在中国农业生产中。其养殖水田可能存在系列有机硅化合物,从而引起养殖动物和植物的氧化应激反应。目前,有机硅对水生动物的毒性和氧化胁迫应
第一部分新型二价高血压疫苗的构建目的:高血压的临床治疗往往需要针对多靶点联合用药,而现有的高血压疫苗仅针对单一治疗靶点。为了研制更具有应用潜力的高血压疫苗,我们将探索构建针对两种不同靶点的新型二价高血压疫苗。方法:将分别来源于人血管紧张素II受体1型和L型钙通道的短肽抗原表位插入经过修饰的乙型肝炎病毒核心抗原（HBc Ag）的免疫优势区,构建重组蛋白。重组蛋白由大肠杆菌系统表达,采用聚丙烯酰胺凝胶
第一部分Glycitin对人胰腺癌细胞增殖和凋亡影响的研究目的研究Glycitin对人胰腺癌细胞增殖、凋亡等的影响。方法采用CCK-8检测细胞增殖活性;细胞克隆形成能力用Colony formation assay进行检测;细胞凋亡用Annexin V-FITC/PI双染色法进行检测;Western Blot检测凋亡相关蛋白（Cleaved PARP,Cleaved caspase3）的表达水平;
蛋白质是具有空间结构的生物大分子,也是一切生命体及生命活动的重要物质基础。土壤酶作为具有催化能力的一类蛋白质,在营养元素的生物地球化学循环中起着重要作用;此外,人类的工农业生产、生活使得一些具有毒性或致病性的蛋白质通过多种途径进入土壤、地下水和沉积物体系。蛋白质进入环境后易与有机质、矿物等土壤活性组分结合,进而改变蛋白质的活性和稳定性。但现有研究多集中于蛋白质与土壤活性组分的界面相互作用上,对蛋白
宿主限制性天然免疫分子三基序蛋白5a （TRIM5a）和主要组织相容性复合物（MHC）是人类基因中决定疾病的易感性和发病速度的重要因素,在机体免疫反应的各个层面上抑制病毒复制起关键性作用的因素之一。研究TRIM5a基因多态性与HIV-1感染和疾病进程相关性具有十分重要的理论意义和现实价值,许多研究表明食蟹猴MHC基因的多态性会显著影响药物实验结果,同时也会影响SIV病毒的感染与复制。虽然食蟹猴已广
谷氨酸特异性内肽酶（GSE）是一种对谷氨酸羧基形成的肽键具有很强专一性的丝氨酸蛋白酶，在蛋白质序列及结构分析、多肽合成及活性多肽回收方面有着广泛的应用。由于大多数谷氨酸特异性内肽酶的晶体结构目前无法获得，因此我们对于其底物特异性的机制还不够了解。地衣芽孢杆菌谷氨酸特异性内肽酶（GSE-BL）与应用较广泛的来自金黄色葡萄球菌V8菌株的谷氨酸特异性内肽酶（V8-GSE）相比，对谷氨酸有着更强的底物专一
语言教育历来都是语言学研究的一个重点。语言教育起先一般是母语教育,中国古代的语文教育起源甚早,成就颇大。《周礼·保氏》中云“教国子以道”,这就是中国早期的语文教育。语文教育,可以促进语言的研究,中国传统的“小学”就是在语文教育中逐渐发展起来的。以“六书”为核心的古代文字学研究,就是早期语文教师所发现并总结出来的文字学理论,对后世文字学的研究产生了极大的影响。在全球化的背景下,第二语言的习得,外语的