研究背景多发性硬化（multiple sclerosis,MS）是中枢神经系统（central nervous system,CNS）炎性脱髓鞘疾病，病因和发病机制尚不明确。近年来其发病呈现明显的增高趋势，是导致青年人神经功能障碍的主要疾病,严重威胁着青年人的健康和生存质量。载脂蛋白2（Lipocalin2,LCN2）作为新发现存在于脑脊液和脑实质的蛋白质，在炎症、免疫反应中起到重要作用。在MS患者脑脊液可以检测到增高的LCN2水平，提示载脂蛋白2水平可能与MS有关联，包括成为MS脑脊液中的标记物。随着科技日新月异,涉及中枢神经系统脱髓鞘疾病的诊断方法越来越精细，从而能够更好的服务临床。但是，当前更多的MS患者通过用药仅能缓解病情，所以，MS的病理生理机制需要进行进一步深入研究，从而为多发性硬化的治疗提供更多理论及实验依据。目的通过髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（myelin oligodendrocyteglycoprotein35-55,MOG35-55)免疫小鼠构建经典的实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE）模型，测定小鼠脑组织中LCN2表达情况及其血清中CXCL10水平，以及使用氟西汀后的变化情况，探讨氟西汀在MS疾病中的作用机制。方法1.实验分组和干预方法：选取雌性C57BL/6小鼠总共80只，8-10周龄大小，体重在18～20g，被随机分为四组，每组20只。用生理盐水加完全弗氏佐剂（Complete Freund’sAdjuvant，CFA）免疫动物对照组小鼠。以MOG35-55及含有卡介苗的CFA免疫动物EAE组小鼠，即建立EAE模型。干预组建模前经紫外线（280～320nm）照射，以MOG35-55及含有卡介苗的CFA免疫动物，建立EAE模型。氟西汀组建模前经紫外线（280～320nm）照射，以MOG35-55及含有卡介苗的CFA免疫动物，建立EAE模型，免疫当天开始给予氟西汀（10mg/kg）灌胃，直至处死。对照组、干预组和EAE组小鼠均每天给予等量生理盐水灌胃处理，并持续至处死。2.构建动物模型方法：制作诱导乳剂是通过向MOG35-55中加入生理盐水进行稀释，稀释浓度为3mg/ml，再将此液体与等体积的完全弗氏佐剂混合，使用玻璃注射器最终抽吸成油包水状。按0.2ml/只给予模型组及干预组C57BL/6小鼠背部中央偏头侧皮下4点注射诱导乳剂，于免疫后第0天、第2天分别进行腹腔注射百日咳毒素400ng，建立EAE动物模型。3.神经功能评分：免疫结束后，每天观察小鼠精神状态，进食以及活动情况等有无变化。同时评估小鼠神经功能，采用国际认可的Kono评分标准。4.检测指标：取额叶及脑室周围脑组织做石蜡切块，行HE染色，用免疫组化化学法测定脑组织中LCN2的表达。ELISA试剂盒检测血清CXCL10含量。结果1.C57BL/6小鼠发病情况：小鼠经抗原免疫后临床症状逐渐加重，可表现为精神萎靡，食欲差，体重下降，皮毛欠光滑等情况，并且出现尾部无力，继而后肢无力，最后前肢无力甚至大小便均失禁等临床症状，小鼠发病临床表现呈现动态性改变，以后稳步进入慢性期阶段。干预组、氟西汀组两组小鼠发病时间和病情高峰期均较EAE组出现后移，临床症状也相对减轻。2.HE染色结果：EAE组小鼠脑组织伴有明显的炎性细胞浸润现象，在脑组织病变主要集中在软膜下和脑室周围白质，可见血管袖套现象和明显的脑膜炎表现，以单核细胞浸润为主；干预组、氟西汀组中炎性细胞浸润现象明显减少。3.免疫组化染色结果：各组均有阳性细胞存在，EAE组白质空泡形成、疏松明显。EAE组（57.33±3.670）、氟西汀组（48.00±5.899）和干预组（49.33±5.785）阳性细胞数平均秩次明显高于对照组（13.00±3.742），且具有统计学意义（P＜0.05）。氟西汀组和干预组阳性细胞数较EAE组明显减少（P＜0.05）。氟西汀组阳性细胞数较干预组无明显变化（P＞0.05）。4.小鼠血清CXCL10水平ELISA结果：EAE组CXCL10含量较氟西汀组高，氟西汀组较对照组也升高（P＜0.05）。5.Pearson相关分析显示：EAE组小鼠脑组织中LCN2阳性细胞数平均秩次和血清CXCL10含量之间存在正相关（P＜0.05）。结论1.氟西汀可以推迟EAE小鼠的发病时间，减轻疾病对神经系统功能损害。2.氟西汀能够减轻EAE小鼠脑组织中炎性细胞浸润程度，对EAE小鼠起到保护作用。3.氟西汀能够降低EAE小鼠脑组织中LCN2表达，降低EAE小鼠血清CXCL10水平，发挥抗炎作用，提示其在治疗人类MS方面具有很有希望的应用前景。