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研究背景与目的腹股沟疝是常见的普通外科疾病。据调查,腹股沟疝的病发率为3-5‰,而在60岁以上男性中,其病发率可高达l~5%。迄今为止,腹股沟疝的明确病因依然不清楚。多年来人们一致认为,腹腔内压的升高和腹壁强度的降低是腹股沟疝发生的两个主要病因。近些年,有学者从生化角度探求腹股沟疝的病因,研究发现:腹股沟疝患者体内结缔组织中I型胶原蛋白含量偏低、III型胶原蛋白含量相对升高,I/III型胶原蛋白比例失调,使腹股沟后壁腹横筋膜薄弱甚至缺损,最终引起腹股沟疝疾病发生,结果显示胶原代谢紊乱与腹股沟疝的发生密切相关。胶原蛋白是细胞外基质(ECM)中最主要的成分之一。其代谢主要受MMPs、TIMPs(MMPs的抑制因子)的共同调节。目前,MMP-2、TIMP-2与腹股沟疝发生的关系研究,国际与国内报道甚少,有学者仅用免疫组化及RT-PCR方法研究报告结果。本试验研究应用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-Time PCR)技术,来探究和分析MMP-2 m RNA、TIMP-2 m RNA在腹股沟疝病人腹直肌前鞘中的表达与腹股沟疝发生的关系,从生物化学角度进一步探讨腹股沟疝的病因,为之后研究该病的病机提供理论基础,及为后续的临床治疗提供理论依据。材料与方法本实验设有实验组和对照组,两组均为男性手术患者。组织标本取自从2016年2月至2016年11月在我院行手术治疗患者,取材部位:均为下腹部腹直肌前鞘,面积为5mm*10mm。所有病例取材前均已取得当地伦理委员会批准,并且得到患者自己的同意。实验组:腹股沟疝患者48例,其中包括斜疝组32例,直疝组16例。对照组:无疝患者10例,组织标本取自接受其他下腹部手术的病人。吸烟者定为:每日吸烟>l0支,烟龄>10年。实验组与对照组共58例中,吸烟者19例,非吸烟者39例。家族史:直系亲属中有两人以上(包括患者本人)患有腹股沟疝者为有家族史,家族包括祖父母、外祖父母、父母、兄弟姐妹、子女以及孙子女。实验组与对照组共58例中,其中有家族史者6例,无家族史者52例。排除标准:两组中正在接受甾体类激素、其它免疫抑制剂治疗患者(包括肿瘤化疗)、有局部炎症病史者、糖尿病及结缔组织病患者等均应排除。用Real-Time PCR技术检测腹股沟疝患者腹直肌前鞘中MMP-2、TIMP-2m RNA的表达水平。所得数据运用统计软件SPSS21.0进行处理,计量均数用均数±标准差(x±s)表示。数据的相关分析采用Pearson方法,多组间均数比较应用单因素方差分析,采用t检验对两组间均数进行比较,α=0.05为检验水准,即P<0.05认为差异有统计学意义。结果1.实验组(直疝组、斜疝组)和对照组中MMP-2 m RNA及TIMP-2 m RNA的表达。MMP-2 m RNA的表达:对照组为1.530±0.612。直疝组为3.098±1.289,与对照组比较P=0.035(<0.05),差异有统计学意义。斜疝组为2.221±0.962,与对照组比较P=0.401(>0.05),差异无统计学意义。直疝组与斜疝组比较P=0.016(<0.05),差异有统计学意义。TIMP-2 m RNA的表达:对照组为1.021±0.395。直疝组为0.641±0.308,与对照组比较P=0.024(<0.05),差异有统计学意义。斜疝组为0.687±0.324,与对照组比较P=0.608(>0.05),差异无统计学意义。直疝组与斜疝组比较P=0.019(<0.05),差异有统计学意义。2.吸烟者与非吸烟者中MMP-2 m RNA及TIMP-2 m RNA的表达。MMP-2m RNA的表达:吸烟组为2.710±1.058,呈高表达。非吸烟组为1.704±0.556,呈低表达。二者比较(t=3.241)p=0.005(<0.05),差异有统计学意义。TIMP-2 m RNA的表达:吸烟组为0.628±0.223,呈低表达。非吸烟组为0.783±0.394,呈高表达。二者比较(t=2.489)p=0.023(<0.05),差异有统计学意义。3.有家族史者与无家族史者中MMP-2 m RNA及TIMP-2 m RNA的表达。MMP-2 m RNA的表达:有家族史者为3.358±1.054,呈高表达。无家族史者为3.019±1.476,呈低表达。二者比较(t=1.391)p=0.032(<0.05),差异有统计学意义。TIMP-2 m RNA的表达:有家族史者为0.507±0.224,呈低表达。无家族史者为0.758±0.358,呈高表达。二者比较(t=2.376)p=0.014(<0.05),差异有统计学意义。结论1.腹股沟直疝患者腹直肌前鞘中MMP-2 m RNA呈高表达,TIMP-2 m RNA呈低表达,表明两者同时参与了胶原代谢的过程,并与腹股沟直疝的形成显著相关。与腹股沟斜疝的发生发展无明显关系,而斜疝的发生可能与鞘状突学说等其他因素有关。2.在吸烟者中MMP-2 m RNA表达较高、TIMP-2 m RNA表达较低,表明吸烟是腹股沟疝发生的重要因素之一。3.有家族史者MMP-2 m RNA呈高表达、TIMP-2 m RNA呈低表达,表明腹股沟疝的发生与遗传因素有关。