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目的:利用T系Jurkat白血病细胞建立裸鼠动物模型,对其进行生物学鉴定,研究T细胞活化衔接蛋白(LAT)及其棕榈酰化,在CD59分子介导T淋巴细胞活化信号转导中的作用。方法:体外培养人Jurkat细胞,构建LAT-EGFP(LAT分子高表达)、LAT-M-EGFP(LAT分子棕榈酰化位点突变)的慢病毒载体,转染入Jurkat细胞,从而建立稳定表达目的基因的细胞株。BALB/C纯系雌性裸鼠24只,编号后随机抽取,分为空白对照组1组,以及实验组3组:LAT组、LAT-M组和正常Jurkat组,每组6只。第一、第二天通过腹腔注射定量的环磷酰胺,第三天用尾静脉注射的方法,实验组小鼠分别接种Jurkat细胞株5×106个/只,空白对照组小鼠则尾静脉注射等量无菌PBS溶液,注射定时定量,连续两天。观察小鼠发病一般体征,分别于移植后第1周(7d)、第2周(14d)、第3周(21d)、第4周(28d)监测体质量及外周血白细胞数量变化;并用ELISA检测模型小鼠外周血中IL-2表达水平;取肝脾组织进行HE染色观察;流式细胞术(FCM)检测骨髓白血病细胞增殖率;免疫组化染色法检测肝组织中细胞凋亡调控蛋白Bcl-2、Caspase-3的表达水平;血涂片于激光共聚焦显微镜下观察CD59单克隆抗体活化前后LAT在细胞膜上的定位。结果:静脉移植Jurkat细胞后,实验组小鼠逐渐出现病态体征,表现为嗜睡、食欲减退、体质量减轻、精神萎靡、弓背、后肢瘫痪等症状,外周血WBC计数呈增高趋势,生存时间较对照组明显缩短,肝脾组织HE染色及骨髓涂片光镜下观察均可见肿瘤细胞浸润,建模成功,对照组小鼠活力正常均存活。实验组中LAT组小鼠第四周即出现濒死状态,伴脊柱侧弯,呈恶病质,WBC计数高于其他各组。ELISA检测结果示LAT组血清中IL-2表达水平高于LAT-M组和Jurkat组。促凋亡因子Caspase-3在LAT-M组中的表达高于LAT组和Jurkat组,促进细胞活化的Bcl-2蛋白,在LAT组中的表达高于LAT-M组和Jurkat组,且LAT-M组表达水平低于Jurkat组。流式细胞术检测到LAT组白血病细胞增殖率高于LAT-M组和Jurkat组。通过激光共聚焦显微镜观察LAT组提示,于细胞膜上可见LAT分布且点簇状聚集于脂筏,经CD59单抗交联后,点簇状聚集较刺激前更为明显;而在LAT-M组中,可见LAT分子散在分布,未见点簇状聚集,CD59抗体作用后无明显变化。结论:成功建立T系Jurkat白血病细胞裸鼠动物模型。从体内实验证实LAT分子及其棕榈酰化在T细胞活化信号转导中的正向激活作用;CD59分子通过向LAT提供棕榈酰基团,进而共同定位于脂筏,介导T细胞的信号转导。