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为了开发研制禽用微生物添加剂,本研究从北京油鸡盲肠黏膜和粪便中分离鉴定得到5株球菌和2株乳酸杆菌,通过OD600nm值和pH值的测定,筛选出优良乳酸杆菌,确定其最佳培养条件。并对优良乳酸杆菌进行了培养基优化、50L发酵罐扩大培养、冷冻干燥过程,最后将冻干菌粉用于肉鸡生产中测定肉鸡盲肠黏膜和粪便中乳酸菌与大肠杆菌的数量,结果表明:(1)本试验从北京油鸡的盲肠黏膜和粪便中分离出了41株菌种,通过对菌种的菌落形态的观察以及染色油镜观察,共筛选出7株进行乳酸菌属种的生理生化鉴定,并根据进一步的糖发酵试验,确定M1、M2为盲肠肠球菌,F5、F8、F11为粪肠球菌,M3为短乳杆菌,M8为戊糖乳杆菌。(2)在通气(加棉塞震荡)培养和密闭(恒温静置)培养两种培养条件下对乳酸杆菌M3和M8生长OD600nm值和pH值进行了测定,结果显示:M3在通气培养条件下菌株OD600nm值最高为1.154,pH值从5.86下降到4.16,密闭培养条件下OD600nm值最高值为1.157,pH值从5.85下降到4.14,M3在两种培养条件下生长趋势相差不多;M8在通气培养条件下菌株OD600nm值为1.011,pH值从5.64下降到4.36,而在密闭培养条件下OD600nm值可达到2.083,pH值从5.64降到3.42。因此,筛选M8为优良乳杆菌,最佳培养条件为密闭培养。(3)添加不同比例的菊粉替代部分葡萄糖,采用密闭培养条件,测定M8生长OD600nm值和pH值,结果表明:M8均在20h进入稳定生长期,28h左右OD600nm达到最高值。其中效果最好的为3%菊粉添加量,最高OD600nm达到2.937,pH从5.81降到3.37。(4)采用50L发酵罐扩大培养,在发酵到20h时,M8开始平稳生长,进入稳定期,在23h时达到最高值,OD600nm值为2.502。在27h时,M8生长缓慢,其OD600nm值开始下降,确定最佳收菌期为20h。(5)将M8发酵液分别在常温和4℃冰箱中贮存,结果表明:M8发酵液在常温保存时,从最初的1.37×109 cfu/ml降到6.79×107cfu/ml,差异极显著(p<0.01);M8发酵菌液在4℃冰箱贮存时,最初为1.1×109cfu/ml,贮存12天时活菌数降为5.11×108cfu/ml,差异极显著(p<0.01),因此,乳酸杆菌M8不适合以发酵液体的形式保存。(6)本试验测定了15种不同保护剂组合对M8在冷冻干燥中的存活率的影响。结果表明:保护剂对提高冻干过程中M8的存活率具有明显效果,并且不同保护剂协同累加效果不同,其中18%脱脂奶粉+1%蔗糖+1%甘油+2%淀粉的活菌存活率为96.64%。(7)Ⅲ组(添加M8冻干菌粉)与Ⅱ组(抗生素组)相比能使盲肠黏膜上乳酸菌数量显著增加(p<0.05),与Ⅰ组(对照组)相比差异极显著(p<0.01),而添加M8冻干菌粉后盲肠黏膜大肠杆菌数变化不明显(p>0.05);粪中乳酸菌数量以及大肠杆菌数量变化均不明显(p>0.05)。