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采用骨组织形态计量学方法,探讨具有滋补肾阴作用的单味中药-桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对去卵巢所致骨质疏松症大鼠的治疗作用,并着重从破骨细胞分化调控因子和与骨代谢密切相关的激素和细胞因子的角度,初步揭示这四味中药的作用机理及其特点,为中医药治疗骨质疏松症以及阐明“肾主骨”的机理提供进一步的实验依据。方法选用雌性Wistar大鼠94只,随机分为3组:空白对照组12只,假手术组12只,造模组70只。在术后1个月,再将造模组大鼠随机分为6组,即模型组、阳性对照组、墨旱莲组和山药组,每组12只;桑寄生组、五味子组,每组11只。在切除大鼠卵巢1个月后,桑寄生组、墨旱莲组、五味子组和山药组分别灌胃给予相应药物的水煎剂,5.6ml/kg体重,1g生药/ml,给药剂量为5.6g生药/kg;阳性对照组灌胃给予浓度为0.008mg/ml的己烯雌酚,5.6ml/kg体重,给药剂量为0.0448mg/kg。以上给药1d 1次,连续6d,休息1d后,再连续给药6d,如此给药3个月。空白对照组、假手术组、模型组按同法灌服等体积的蒸馏水。各组大鼠于处死前15d和前3d分别腹腔注射盐酸四环素30mg/kg体重,以对骨进行荧光标记。给药结束后,将大鼠以45mg/kg剂量的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,股动脉取血,用于检测外周血清中IL-1、IL-6、BGP、CT、PTH的含量。然后,再将各组大鼠迅速处死,取右侧胫骨制作不脱钙骨切片,用于骨组织形态计量学指标的检测,取左侧胫骨制作冰冻切片,以检测成骨细胞和骨髓基质细胞OPG和RANKL的蛋白表达。统计学处理方法:实验结果皆以均数±标准差（（?）±s）表示,采用单因素方差分析（ANOVA）进行处理,组间两两比较,采用q检验。结果1桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨骨组织形态计量学指标的影响1.1桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨TBV%的影响与假手术组相比,模型组大鼠胫骨TBV%明显降低。阳性对照组的TBV%显著高于模型组,而与假手术组相比,无显著性差异。桑寄生组、墨旱莲组、五味子组和山药组的TBV%均明显高于模型组,而显著低于假手术组。（见表1）表1各组大鼠胫骨TBV%的变化注:与假手术组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较:△P<0.05,△△P<0.01;下同。1.2桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨TRS%的影响模型组大鼠胫骨TRS%显著高于假手术组。阳性对照组的TRS%显著低于模型组,而与假手术组比较,无显著性差异。桑寄生组、墨旱莲组、五味子组和山药组的TRS%均显著低于模型组,而明显高于假手术组。（见表2）表2各组大鼠胫骨TRS%的变化1.3桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨TFS%、和MAR的影响模型组大鼠胫骨TFS%和MAR较假手术组皆显著增高。与模型组相比,阳性对照组的TFS%和MAR皆显著降低;而与假手术组相比,无显著性差异。桑寄生组、墨旱莲组与五味子组的TFS%和MAR与模型组相比,均明显降低;但明显高于假手术组。山药组TFS%和MAR显著低于模型组;而与假手术相比,无显著性差异。（见表3）表3各组大鼠胫骨TFS%和MAR的变化1.4桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨OSW和mAR的影响模型组大鼠胫骨OSW和mAR显著高于假手术组。阳性对照组的OSW和mAR显著低于模型组;而与假手术组相比,无显著性差异。与模型组相比,桑寄生组和墨旱莲组的OSW、mAR均无显著性差异;而与假手术相比,桑寄生组的mAR明显升高,墨旱莲组均无显著性差异。五味子组的mAR明显低于模型组,与假手术组相比,OSW、mAR皆无显著性差异。山药组的OSW、mAR显著低于模型组;而与假手术组相比,均无显著性差异。（见表4）。表4各组大鼠胫骨OSW和mAR的变化2桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨OB和MSC OPG和RANKL蛋白表达的影响2.1桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨OB和MSC OPG蛋白表达的影响模型组大鼠胫骨OB和MSC OPG蛋白表达阳性密度均明显低于假手术组。阳性对照组OB和MSC OPG蛋白阳性表达密度均明显高于模型组;而与假手术组比较,无显著性差异。与模型组相比,桑寄生组、五味子组和山药组OB和MSC OPG蛋白表达阳性密度均明显升高;而与假手术相比,MSC OPG阳性表达皆明显降低,OB OPG的阳性表达则无显著性差异。墨旱莲OB和MSC OPG蛋白表达阳性密度较模型组皆无显著性差异;而与假手术相比,皆明显降低。（见表5）表5各组大鼠胫骨OB和MSC OPG蛋白的变化2.2桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠胫骨OB和MSC RANKL蛋白表达的影响模型组大鼠胫骨OB和MSC RANKL蛋白表达阳性密度均明显高于假手术组。与模型组相比,阳性对照组OB和MSC RANKL蛋白阳性表达密度均明显降低;而与假手术组相比,无显著性差异。墨旱莲组、山药组OB和MSC RANKL与模型组相比皆显著降低;而与假手术相比,无明显差异。桑寄生组OB和MSC RANKL与模型组相比皆无显著性差异;而与假手术相比,皆显著增高。五味子组的OBRANKL与模型组比较明显降低:而MSC RANKL无显著性变化,且明显高于假手术组。（见表6）表6各组大鼠OB和MSC RANKL蛋白表达阳性密度的变化3.桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠外周血清IL-1、IL-6、BGP、CT、PTH含量的影响。3.1桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠外周血清IL-1、IL-6含量的影响模型组大鼠外周血清中IL-1、IL-6含量皆显著高于假手术组。阳性对照组IL-1、IL-6含量显著低于模型组;而与假手术组相比,无显著性差异。与模型组相比,桑寄生组IL-1含量显著降低,IL-6含量则无显著性差异;而与假手术组相比,皆明显增高。墨旱莲组IL-1含量显著高于假手术组,而与模型组相比无显著性差异;IL-6含量显著低于模型组,而与假手术组相比无显著性差异。五味子组IL-1、IL-6含量皆低于模型组;而与假手术组相比,IL-6含量明显升高,但IL-1含量无显著性差异。山药组IL-1、IL-6含量皆显著低于模型组,而与假手术组相比,IL-1显著增高,但IL-6无显著性差异。（见表7）表7各组大鼠外周血清中IL-1、IL-6含量的变化指标比较3.2.桑寄生、墨旱莲、五味子和山药对卵巢切除大鼠外周血清中BGP、CT、PTH含量的影响。模型组大鼠外周血清BGP含量显著高于假手术组。与模型组相比,阳性对照组BGP含量显著降低;而与假手术组相比,无显著性差异。与模型组相比,桑寄生与墨旱莲组BGP含量皆无显著性差异;而较假手术组皆明显增高。五味子组BGP含量明显低于模型组;而与假手术相比,无显著性差异。山药组BGP含量显著低于模型组而明显高于假手术组。与假手术组相比,模型组大鼠外周血清CT含量显著降低。阳性对照组CT含量较模型组显著增高;而与假手术组相比,无显著性差异。与模型组相比,桑寄生组与墨旱莲组CT含量皆显著增高;而与假手术组相比,皆显著性降低。五味子组CT较模型组明显增高;而与假手术相比,无显著性差异。与模型组相比,山药组CT含量显著性增高;而与假手术组相比,则无显著性差异。模型组大鼠外周血清中PTH含量与假手术组相比,无显著性差异;各给药组与模型组相比,皆无显著性变化。（见表8）表8组大鼠外周血清BGP、CT、PTH含量的变化指标比较结论（1）切除大鼠卵巢可造成一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症模型,而桑寄生、墨旱莲、五味子和山药能在一定程度上对其产生抑制作用,并使之恢复到骨形成大于骨吸收的相对平衡状态,从而达到治疗骨质疏松症的作用。（2）桑寄生、墨旱莲、五味子和山药能通过对破骨细胞分化调控因子和与骨代谢密切相关的细胞因子及激素中的某些环节产生调节作用,进而达到治疗目的,并呈现出不同的作用特点,具体情况如下:山药和五味子均能增强成骨细胞与骨髓基质细胞OPG表达而抑制RANKL表达:降低外周血中IL-1、IL-6的水平而提高CT的水平。桑寄生能增强OPG表达,降低IL-1水平和提高CT的水平,但对RANKL以及IL-6无影响。墨旱莲可降低RANKL表达,降低IL-6水平和提高CT的水平,而对OPG和IL-1无影响。以上各药对外周血中PTH均无明显影响。