苯并(a)芘对A549细胞HIF-1信号通路的影响

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目的:  研究不同浓度的苯并(a)芘[B(a)P]对 A549细胞HIF-1信号通路的影响。方法:  (1)MTT法检测不同浓度的B(a)P作用不同时间对A549细胞活力的影响;  (2)以不同浓度的B(a)P处理A549细胞一定时间后,采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测CYP1B1、CYP1A1、CAⅨ及VEGF的mRNA和蛋白表达情况;  (3)应用免疫沉淀法检测不同浓度的B(a)P对A549细胞AhR和HIF-1α与ARNT/HIF-1β结合程度的影响。  结果:  (1)MTT法检测结果显示:低浓度的 B(a)P不会对A549细胞产生毒性,且能明显促进细胞增殖,特别是当B(a)P的浓度为2μM,作用24h时,A549细胞的活力比对照组的高出10%;  (2)以2、4及8μM的B(a)P分别处理 A549细胞24h后,发现CYP1B1、CYP1A1、CAⅨ及VEGF的mRNA及蛋白量表达均升高;  (3)免疫沉淀法检测结果显示,AhR和HIF-1α结合ARNT/HIF-1β蛋白的程度随着B(a)P浓度的增加而增强。  结论:  (1)低浓度的B(a)P在一定时间内促进A549细胞增殖;  (2)低浓度的B(a)P激活AhR的信号通路后,HIF-1介导的CAⅨ、VEGF的mRNA及蛋白表达量均升高;  (3)低浓度的B(a)P诱导的AhR信号通路可以影响HIF-1信号通路的下游效应。
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