论文部分内容阅读
五味子是中国传统中药,其活性成分主要为木脂素类,包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素等,其中五味子乙素含量较高,具有抗氧化、清除自由基、降低谷丙转氨酶、抗癌、抑菌等作用,被广泛用作药品和保健品。本论文在较系统检测分析不同产地五味子主要活性成分含量的基础上,首次采用超声波辅助酶解、超高压等不同新技术来提取五味子乙素,确定其最优工艺条件,比较了不同方法的提取得率和效率,最后对五味子乙素的纯化进行初步探讨,为五味子分离提取和高效应用提供了新技术支持。主要研究内容及结果如下:
1、建立了利用高效液相色谱法(HPLC)同时检测五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素和五味子乙素的高效液相条件:色谱柱为反相C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇:水(73:27,VN);流速1.0mL/min,检测波长254nm。该法具有准确、快速、灵敏度高、重现性好等特点,可用于上述四种木脂素的定量分析。
2、不同产地的四种木脂素含量存在一定的差别,北五味子中五味子醇甲、五味子醇乙和五味子乙素的含量稍高,而五味子甲素含量稍低,南五味子恰与之相反。
3、利用乙醇回流提取五味子乙素,采用60目的五味子粉为原料,用正交试验对其进行优化,最佳工艺条件为:乙醇浓度95％、提取2次、提取时间2h、料液比为1:50,五味子乙素得率为0.478%。
4、利用超声波辅助酶解提取五味子乙素,采用40目的五味子粉为原料,通过响应面试验建立回归模型,最佳工艺条件为:酶解温度53℃、提取时间4h、酶用量0.9696,五味子乙素得率为0.262%。对60目的五味子粉原料进行上述工艺处理,五味子乙素得率为0.44096。
5、利用超高压技术提取五味子乙素,并采用正交试验对其进行优化,最佳工艺条件为:五味子粉碎目数60目、料液比1:30、压力300MPa、保压时间10min,五味子乙素得率为0.542%。该技术具有操作简单、提取得率高、时间短、杂质含量少等优点,为五味子乙素的提取提供了一种新工艺。同时对其它提取方法如超临界CO2萃取、酶解预处理配合超高压、超声波等进行比较得出,超高压技术的提取时间最短,仅为回流提取法及超临界CO2萃取法的1/12,但其乙素得率比上述两种方法分别高出了13.4%和17.6%。利用复合法可提高五味子乙素得率,酶解结合超高压提取五味子乙素的得率最高为0.557%,比单独使用超高压提取提高3%左右。
6、五味子乙素纯化研究,经过乙醇回流提取再通过石油醚二次萃取,石油醚萃取液硅胶柱层析,使用石油醚:乙酸乙酯(5:1,V/V)的混合溶剂进行洗脱,收集五味子乙素色带洗脱液,最后利用乙醇对该洗脱液进行多次重结晶,获得纯度为95.3%五昧子乙素纯品,得率为0.119%。