【摘 要】
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研究目的:观察脓毒症小鼠肺损伤模型中肺组织焦亡与铁死亡的变化,探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2（mitochondrial aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）对脓毒症肺损伤中焦亡与铁死亡机制的可能影响,进一步分析ALDH2、焦亡与铁死亡三者可能的相互作用。研究方法:采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture,CLP）制备脓毒症小鼠肺损伤模型,将
【基金项目】
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安徽省自然科学基金（No.1808085MH280）; 蚌埠医学院第一附属医院科技发展基金（No.Byyfykj201702）
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研究目的:观察脓毒症小鼠肺损伤模型中肺组织焦亡与铁死亡的变化,探讨激动线粒体乙醛脱氢酶2（mitochondrial aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）对脓毒症肺损伤中焦亡与铁死亡机制的可能影响,进一步分析ALDH2、焦亡与铁死亡三者可能的相互作用。研究方法:采用盲肠结扎穿孔法（cecal ligation and puncture,CLP）制备脓毒症小鼠肺损伤模型,将健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为六组:假手术组（Sham）、盲肠结扎穿孔组（CLP）、对照组DMSO+CLP组（DMSO+CLP）、NLRP3炎性小体抑制剂MCC950+CLP组（MCC950+CLP）、铁死亡抑制剂Ferrostatin 1+CLP组（Fer-1+CLP）、ALDH2激动剂Alda-1+CLP组（Alda-1+CLP）。术后24 h称取各组小鼠体重及肺湿重,计算肺系数;HE染色观察肺脏形态学改变;透射电镜显示肺脏超微结构变化;试剂盒检测肺脏组织MDA和组织铁含量变化;DHE荧光探针检测活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平。Western Blot检测ALDH2、4-HNE蛋白表达,并检测焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18及铁死亡关键蛋白GPX4、PTGS2的表达。研究结果:与Sham组相比,CLP组小鼠肺系数增大（P＜0.05）;肺脏组织结构损伤严重（P＜0.001）,中性粒细胞及单核巨噬细胞浸润,线粒体结构破裂、体积减小,板层小体空泡化;肺组织MDA及组织铁含量增高（P＜0.001）;ROS水平明显增强（P＜0.001）;ALDH2、GPX4蛋白表达减少（P＜0.05）,PTGS2、4-HNE及焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18表达增多（P＜0.05）。与CLP组相比,MCC950+CLP组、Fer-1+CLP组和Alda-1+CLP组小鼠肺系数均降低（P＜0.05）;肺组织损伤明显减轻（P＜0.01）,中性粒细胞及单核巨噬细胞浸润减少,线粒体、板层小体损伤有所改善;MDA及组织铁含量减少（P＜0.05～0.001）;ROS水平明显降低（P＜0.01）。ALDH2、GPX4蛋白表达增加（P＜0.05）,PTGS2、4-HNE及焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18表达减少（P＜0.05）。研究结论:脓毒症小鼠肺损伤时,ALDH2表达降低,同时焦亡和铁死亡发生;分别通过激动线粒体ALDH2、抑制焦亡和铁死亡均能不同程度的影响氧化应激水平、焦亡和铁死亡,从而发挥肺保护作用;ALDH2、焦亡和铁死亡三者之间可能存在相互影响。
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