毛细管整体柱(monolithic column)是通过在毛细管内原位聚合或固化的方法制备得到的具有多孔结构的整体棒状固定相。因其制备简单，通透性好，易于改性等优点而成为极具潜力的新一代分离介质。苯硼酸型单体是一种多功能化合物，一方面，它作为硼酸亲和色谱(Boronate affinity chromatography)的配体，可以特异地结合含有顺式二羟基的化合物；另一方面，它作为一种弱酸，在适合条件下可以成为一种弱阳离子交换剂。本论文制备了一种新型的poly(VPBA-co-PEGDA)多功能毛细管整体柱，以微径液相色谱(μHPLC)和加压毛细管电色谱(pCEC)为平台，考察了其不同的分离机理。包括硼酸亲和机理、反相疏水作用和离子交换机理。并同时利用该整体柱的离子交换和反相双重机理，成功分离了四种蛋白混合物。最后还将poly(VPBA-co-PEGDA)整体柱应用于鸡蛋清中溶菌酶的提取分离。全文分为五个部分，具体内容如下：第一部分主要从方法、原理和应用等方面阐述了本论文的相关研究背景。首先介绍了本技术的应用平台——加压毛细管电色谱和毛细管液相色谱的理论基础和应用优势；然后概述了毛细管整体柱的相关信息，包括其分类、一般制备过程和应用等；最后介绍了与本技术相关的硼酸亲和色谱和离子交换色谱的作用机理和应用进展。第二部分详细介绍了苯硼酸型poly(VPBA-co-PEGDA）毛细管整体柱的制备方法、优化过程和形态表征。选用4-乙烯基苯硼酸(VPBA)为单体，聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)为交联剂，偶氮二异丁腈(AIBN）为引发剂、乙二醇和二甘醇为致孔剂，通过原位聚合制备整体柱。以柱效和亲和特性为参考标准，对反应物配方进行了优化，包括单体与交联剂的比例，二元致孔剂体系的比例，最终确定反应配方为VPBA15.6mg，PEGDA10.2mg，AIBN0.5mg，二甘醇170μL，乙二醇45μL。对最优条件下制备得到的整体柱进行了表征，扫描电镜证明整体柱固定相空隙分布均匀；另考察了其最大载量、柱效以及分离特性。第三部分以微径液相色谱(μHPLC)和加压毛细管电色谱(pCEC)模式为平台，探讨了poly(VPBA-co-PEGDA）毛细管整体柱的硼酸亲和机理和反相保留的机理。分离了两对化合物——对苯二酚、邻苯二酚和苯甲酸、咖啡酸，结果表明合成的整体柱对含有顺二羟基结构的邻苯二酚和咖啡酸能够特异吸附，证明该整体柱具有良好的亲和特性；而对苯系物和杂环类化合物的分离又表现出典型的反相机理。第四部分利用poly(VPBA-co-PEGDA)毛细管整体柱的离子交换机理，分别分离了牛血清白蛋白、核糖核酸酶（牛胰）、细胞色素C和溶菌酶这四种蛋白。发现非碱性蛋白不被整体柱保留，被直接冲出柱外；而细胞色素C和溶菌酶等碱性蛋白则被特异吸附，从而可以从蛋白混合物中分离、提取出来。在以上实验的基础上，创新性地同时利用了该整体柱的离子交换和反相的双重机理，成功分离了四种蛋白混合物（两种酸性蛋白、两种碱性蛋白），更加充分地利用了所制备的整体柱。第五部分验证了poly(VPBA-co-PEGDA)整体柱特异捕获碱性蛋白的能力。以商品化的各种蛋白混合样品为实验样品，结果证明该整体柱可以从中分离出碱性的细胞色素C和溶菌酶。并利用poly(VPBA-co-PEGDA)整体柱从鸡蛋清实际样品中提取分离出了溶菌酶。HPLC实验表明，将蛋清稀释后直接进样，溶菌酶的色谱峰极小，基本无法看出；而同样的样品经poly(VPBA-co-PEGDA)整体柱富集后，溶菌酶的色谱峰则显著增强，富集效果约为8倍。