论文部分内容阅读
本文考察了酸、酶、紫外辐射诱导对木豆叶中木犀草素、芹菜素含量的影响，并对超声提取，大孔吸附树脂分离，聚酰胺柱层析纯化酶诱导后木豆叶中木犀草素、芹菜素的工艺条件进行了系统的研究。1．确定了反相高效液相—二极管阵列检测器方法同时测定木豆叶中木犀草素、芹菜素的条件：色谱柱：HIQ SIL C18V柱(250 mm×4.6 mm I.D.)，流动相：乙腈—水—乙酸(30：69.3：0.7，v／v／v)，流速：1 mL／min，检测波长345 nm，进样量10μL，柱温30℃。2．考察了酸诱导及酶诱导条件对木犀草素、芹菜素含量的影响，对影响含量的主要因素进行了研究，确定了最佳工艺参数。酸诱导水解处理木豆叶的工艺参数为：水解方式：双向酸水解盐酸浓度：0.5 mol／L水解时间：8 h水解温度：90℃在上述优化的条件下，酸诱导水解处理后木犀草素的含量为0.124 mg／g，芹菜素的含量为0.056 mg／g，分别比未经酸诱导水解处理提高61.1％和43.6％。酶诱导处理木豆叶的工艺参数为：酶种类：果胶酶酶浓度：0.4 mg／mL酶诱导时间：36h酶溶液pH值：3.5—4温度：30—35℃在上述优化的条件下，酶诱导处理后木犀草素的含量为0.268 mg／g，芹菜素的含量为0.132 mg／g，分别比未经酶诱导处理提高248.1％和238.5％。3．确定了以酶诱导后木豆叶为原料，超声提取木犀草素、芹菜素的工艺条件：提取溶剂：体积分数80％乙醇溶液液固比：20：1提取次数及时间：3次，每次15 min，共45 min提取功率：250 W在上述条件下，木犀草素、芹菜素的提取率分别为0.257 mg／g和0.126 mg／g，在浸膏中的含量分别为0.169％和0.083％。4．应用大孔吸附树脂对木犀草素、芹菜素进行了分离，确定了AL-2大孔吸附树脂分离木犀草素、芹菜素的最佳条件：上样浓度：木犀草素52.4μg／mL，芹菜素25.6μg／mL上样体积：3 BV上样流速：1.5 BV／h上样pH值：5解吸溶液及体积：体积分数50％乙醇溶液2 BV及体积分数60％乙醇溶液2 BV解吸流速：1 BV／h操作温度：25℃在上述优化的条件下，经过AL-2大孔吸附树脂处理，木犀草素的含量从0.169％增加到2.55％，提高了15.1倍，芹菜素的含量从0.083％增加到0.76％，提高了9.2倍，回收率分别为78.54％和72.31％。5．采用聚酰胺柱层析对AL-2树脂分离后的木豆叶样品进行纯化，体积分数60％乙醇洗脱，木犀草素含量由2.55％提高到42.39％，回收率为69.42％，体积分数80％乙醇洗脱，芹菜素含量由0.76％提高到14.52％，回收率为72.86％。