论文部分内容阅读
【目的】1.探讨白头翁皂苷A是否能诱导K562细胞向红系分化。2.探讨白头翁皂苷A是否能诱导急性髓系白血病细胞株向粒系分化。3.观察白头翁皂苷A作用下K562向粒系分化过程中ERK、p-ERK等分化相关蛋白的表达水平的变化,部分揭示白头翁皂苷A诱导K562细胞向粒系分化的分子机制。4.观察白头翁皂苷A对急性髓系白血病原代细胞的影响。【方法】1.不同浓度的白头翁皂苷A作用K562细胞后,采用联苯胺染色阳性细胞计数、细胞内血红蛋白测定及流式细胞术检测细胞膜表面CD71及GPA分化抗原等方法评价白头翁皂苷A对K562细胞的诱导分化作用。2.不同浓度的白头翁皂苷A作用急性髓系白血病细胞株(K562、U937及HL-60细胞)后,采用刘氏染色法观察细胞形态学改变及流式细胞术检测细胞膜表面CD15分化抗原等方法评价白头翁皂苷A对K562、U937及HL-60细胞的诱导分化作用。3.不同浓度的白头翁皂苷A联合U0216作用K562细胞后,通过Western印迹检测ERK及p-ERK水平的变化,并通过流式细胞术检测细胞膜表面CD15分化抗原的表达。4.通过流式细胞术检测急性髓系白血病原代细胞膜表面相关抗原的表达评价白头翁皂苷A对急性髓系白血病原代细胞的影响。【结果】1.白头翁皂苷A对K562细胞的红系诱导分化作用不同浓度的白头翁皂苷A均可升高K562细胞内血红蛋白含量;上调K562细胞膜表面CD71及GPA分化抗原的表达。其中以4μg/ml的白头翁皂苷A的作用最为显著。2.白头翁皂苷A对急性髓系白血病细胞的粒系诱导分化作用不同浓度的白头翁皂苷A均可上调K562、U937及HL-60细胞膜表面CD15分化抗原的表达,且呈剂量依赖性;并在形态上有趋向粒系分化的改变,其中在K562、U937及HL-60细胞分别以5μg/ml、4μg/ml及3μg/ml的白头翁皂苷A的作用最为显著。3.白头翁皂苷A诱导K562细胞粒系分化机制的初步研究在干预时间内,白头翁皂苷A可上调ERK的磷酸化水平;在应用MEK/ERK磷酸化抑制剂U0216预处理细胞后,可以抑制白头翁皂苷A所引起的细胞分化。4.白头翁皂苷A对急性髓系白血病原代细胞的影响白头翁皂苷A可上调急性髓系白血病原代细胞表面CD15分化抗原的表达,且部分可影响CD34+的急性髓系白血病原代细胞。【结论】1.白头翁皂苷A可诱导K562细胞向红系分化。2.白头翁皂苷A可诱导急性髓系白血病细胞系(K562、U937及HL-60细胞)向粒系分化。3.白头翁皂苷A诱导K562细胞向粒系分化的分子机制可能与MEK/ERK信号转导通路的激活相关。4.白头翁皂苷A可诱导急性髓系白血病原代细胞向更为成熟的粒系分化。