壳聚糖延缓马家柚采后汁胞粒化发生的作用机理

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马家柚(Citrus grandis(L.)Osbeck cv.Majiayou)是品质优良的地方特色柚类品种,但在贮藏过程中常发生粒化现象,表现为果实颜色黯淡,果肉汁胞失水凝胶化,严重时蜡黄且粗糙,木质化而变得僵硬,影响马家柚的采后品质,阻碍其相关产业的可持续发展。为探究马家柚采后汁胞粒化的发生机制及调控,本研究以成熟采收的马家柚果实为试验材料,采用转录组技术分析室温(20±2℃)贮藏150 d过程中不同粒化程度汁胞的转录组学差异,并以此为基础探讨1.5%壳聚糖涂膜处理对马家柚采后汁胞粒化的影响,主要研究结果如下:1.通过对贮藏0 d(None granulation,NG)、贮藏90 d(Initial granulation,IG)和贮藏135 d(Moderate granulation,MG)的汁胞进行转录组测序分析,总共获得了6376个差异表达基因,其中NG和IG间4623个,NG和MG间4405个,经KEGG注释基因数较多的有新陈代谢途径、次生代谢产物的生物合成、植物病原体的相互作用、植物激素信号转导和苯丙烷生物合成,KEGG和GO显著富集到了次生代谢过程、植物MAPK信号途径、氨基糖和核苷酸糖代谢、几丁质响应、细胞壁组织和氧化还原酶活性等通路中,另外注释较多的转录因子如WRKY、AP2/ERF-ERF、MYB、C2H2及NAC等均与植物胁迫响应有关。结合相关途径基因表达的调控情况,表明马家柚采后汁胞粒化与果实响应逆境胁迫、细胞壁增生过程紧密相关。2.相较于对照,1.5%壳聚糖显著抑制贮藏45 d后粒化指数的增长,维持较好的果实颜色,较高的可溶性固形物(TSS)、总糖、抗坏血酸(As A)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,以及贮藏末期较高的可滴定酸(TA)含量,同时有效抑制超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)物质的积累,提高超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性,并上调表达Mn SOD、APX1和GR2基因。相关性分析中,粒化指数与果实颜色指标、果实糖酸含量、As A和GSH含量、抗氧化酶(SOD、APX、GR)活性、CAT1基因表达量均呈显著负相关(p<0.05),与O2-、H2O2、MDA呈极显著正相关(p<0.01),表明1.5%壳聚糖涂膜处理通过减轻活性氧伤害来延缓马家柚采后汁胞粒化过程。3.在细胞壁代谢过程中,1.5%壳聚糖极显著地抑制90 d后细胞壁物质、木质素、纤维素和半纤维素的积累,以及过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂醛脱氢酶(CAD)活性增强,促进贮藏过程中原果胶的水解,维持较高的水溶性果胶含量,以及较强的果胶甲酯酶(PME)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)和木葡聚糖内糖基转移酶(XTH)活性,并上调细胞壁代谢相关的PME、PG、Cx、XTH33基因的表达,同时下调木质素合成相关的POD、PAL、CAD基因的表达。相关分析中,粒化指数与细胞壁物质、纤维素类物质、木质素含量,POD、PAL、CAD活性及其基因表达量呈极显著正相关(p<0.01),但与果胶物质含量、细胞壁水解酶活性(PME、PG和Cx)、PG和Cx基因表达量呈极显著负相关(p<0.01),揭示1.5%壳聚糖通过促进细胞壁水解,同时抑制细胞壁增生过程,有效延缓马家柚采后汁胞粒化的发生。
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