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该文建立了一套对自行构建的工程菌表达的rhuIFN α 2b非亲和层析的纯化方法,应用该方法,从发酵所得的菌体中纯化得到电泳纯和高效液相纯的rhuIFN α 2b,纯化倍数达1210倍,回收率为30﹪,比活力为1.66×10<8>IU/mg.选择含有酰基的PEG衍生物,合成了两种不同活性基团的PEG衍生物作为修饰剂,一为单甲氧基聚乙二醇琥珀酸琥珀酸亚胺酯(SS-mPEG),另一种为碳酸单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯(SC-mPEG),并对两种修饰剂的修饰结果进行了比较,发现SC-mPEG比SS-mPEG对α 2b干扰素修饰具有更高的选择性,此外,SC-mPEG具有作用平稳,易于通过控制反应条件来控制修饰率,修饰后的干扰素保持较高的活性等特点,最终选择SC-mPEG作为修饰剂.研究了SC-mPEG对rhuIFN α 2b的修饰条件,考察了反应时间,pH值对修饰率的影响并确定了最佳反应条件(pH8.5,4℃,反应1小时),测定了修饰干扰素的活性变化.利用制备型高效液相色谱技术对SC-mPEG修饰干扰素α 2b反应液进行分离、纯化,获得SC-mPEG修饰的干扰素.由于SC-mPEG对干扰素α 2b进行修饰时,最终反应淮中应包括未修饰的干扰素α 2b,单修饰干扰素α 2b,多修饰干扰素α 2b和未与干扰素α 2b反应的SC-mPEG等,根据它们之间分子量的差别,利用制备型高效液相色谱技术对上述反应液中的多种成分进行了分离、纯化,获得了纯度较高的mono-mPEG-IFNα 2b及poly-mPEG-IFNα 2b,并对上述产物采用SDS-PAGE及mariner TOF MS对其进行鉴定,初步证实了其分子量,并对PEG的修饰位点进行了初步研究.选择<125>I标记示踪的SDS-PAGE相结合的方法,研究聚乙二醇修饰干扰素α 2b的血液动力学,组织分布和排泄.以大氧为研究对象,分别按1,3,5μg/kg的剂量股静脉注射给药,颈动脉采血,利用SDS-PAGE测定血液中原形药物放射量与总放射量的百分比,以校正全血血药浓度,对小鼠测定<125>I-干扰素α 2b和<125>I-单修饰干扰素α 2b的组织分布和尿粪排泄.采用MTT法将不同浓度的聚乙二醇修饰干扰素分别对几种肿瘤细胞株进行生长抑制试验,并研究了其对小鼠移植肉瘤S<,180>的影响.