背景:自噬是细胞内通过回收并降解废弃或无用的细胞内成分或细胞器,而为细胞提供能量和原料,维持细胞内环境稳定的过程。自噬参与了多项生理病理过程,与多种疾病相关。自噬在肿瘤中的作用是一把双刃剑,既可抑制肿瘤的发生发展,又可促进肿瘤细胞的存活和耐药。Ulk1是自噬起始所必需的丝/苏氨酸激酶,在自噬中起着重要作用。Ulk1可促进多种肿瘤细胞的存活,高表达Ulk1与多种肿瘤的预后呈负相关。但Ulk1在非小细胞肺癌中的作用尚不明确。肺癌是严重影响公共健康的疾病,是发病率和死亡率最高的肿瘤。非小细胞肺癌病例占肺癌病例的85%以上,对放疗和化疗敏感性低,5年生存率很低。顺铂是非小细胞肺癌常用的化疗药物,但对顺铂的耐药严重影响了顺铂的治疗效果。因此发现新的治疗靶点,增强化疗敏感性对于非小细胞肺癌具有重要作用。目的:本研究主要探讨自噬相关蛋白Ulk1在非小细胞肺癌中的表达,及与患者预后的关系;Ulk1及其选择性抑制剂SBI0206965对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和顺铂敏感性的影响,同时探讨其在非小细胞肺癌中发挥作用的可能机制。方法:(1)通过western-blotting检测肺正常上皮细胞系BEAS-2B及非小细胞肺癌细胞系 A549、H460、HCC827、H292 及 H1299 中 Ulk1 的表达水平;通过 Oncomine数据库分析Ulk1在非小细胞肺癌组织和肺正常组织中的表达差异。(2)利用肺癌预后数据库Kaplan-Meier plotter database分析Ulk1表达量与非小细胞肺癌预后的关系。(3)通过RNAi技术下调Ulk1表达,或用Ulk1选择性抑制剂SBI0206965抑制Ulk1活性,探讨Ulk1对非小细胞肺癌细胞增殖和细胞凋亡的影响。(4)通过RNAi技术下调Ulk1表达,或用Ulk1选择性抑制剂SBI0206965抑制Ulk1活性,探讨Ulk1在非小细胞肺癌细胞系对顺铂的敏感性中的作用。(5)通过MDC染色,吖啶橙染色,GFP-LC3示踪自噬体及western-blotting方法探讨Ulk1及Ulk1选择性抑制剂SBI0206965对细胞自噬的影响,探讨Ulk1在非小细胞肺癌中作用的可能机制。结果:(1)通过搜索Oncomine在线数据库发现,Ulk1在非小细胞肺癌组织中的表达水平高于正常肺组织;通过western-blotting方法发现Ulk1在非小细胞肺癌细胞系中的表达水平高于正常肺上皮细胞系;(2)通过Kaplan-Meier plotter database分析Ulk1的表达量与肺癌预后呈负相关。(3)下调Ulk1可抑制了非小细胞肺癌细胞增殖,增强非小细胞肺癌细胞系对顺铂的敏感性。(4)SBI0206965可抑制非小细胞肺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,增强顺铂敏感性。(5)下调Ulk1或用Ulk1选择性抑制剂SBI0206965抑制Ulk1后,细胞内自噬溶酶体减少,GFP-LC3标记减少,LC3Ⅱ/Ⅰ比值下降,p62增加,细胞抗凋亡蛋白Bc12和Bclx1蛋白水平减少。结论:本研究发现Ulk1在非小细胞肺癌中高表达,且Ulk1的表达量与肺癌预后呈负相关。下调Ulk1或应用SBI0206965可抑制非小细胞肺癌细胞增殖,增强顺铂敏感性。SBI抗肿瘤的可能机制是可通过抑制细胞自噬,减少抗凋亡相关蛋白Bcl2/Bclx1水平。