2003年爆发的高致病性禽流感至今仍未完全控制，不仅给养禽业造成巨大损失，而且导致全球二百余人死亡，对人类的生命健康造成巨大威胁。尽管人类对流感和禽流感的认识已有近百年历史，但现有防治高致病性人流感的医药技术仍十分薄弱。目前，虽然人禽流感疫苗已在实验室研制出来，但其有效性和安全性尚待临床应用检验；用于防治高致病性流感的药物也很少，对人普通流感有较好疗效的药物“达菲”对高致病性人流感的疗效也较差。因此，寻找新型高效安全的抗流感病毒药物，对防治人流感和人禽流感均有十分重要的意义。 穿心莲内酯是中药穿心莲的药效成分，以穿心莲内酯为前体合成的炎琥宁、穿琥宁和亚硫酸氢钠穿心莲内酯等药物在临床上广泛用于肺炎等呼吸道感染性疾病的治疗，但有关穿心莲内酯及其系列药物对流感病毒的作用及其作用机制等基础研究报道却很少。本论文系统地评价了穿心莲内酯、炎琥宁、亚硫酸氢钠穿心莲内酯及新型穿心莲内酯衍生物AL-1体内对流感和禽流感病毒的抑制作用，并初步探讨了其作用机制。 本试验首先建立了H9N2AIV、H1N1 IFV小鼠感染模型及H9N2 AIV细胞感染模型。对13～15g的昆明小鼠，H9N2 AIV感染小鼠的LD50为10-2.896，H1N1 IFV感染小鼠的LD50为10-4.417。2倍LD50的H9N2 AIV及H1N1 IFV可使感染小鼠的死亡率达到80％以上， 70mg/kg的利巴韦林可使感染小鼠的存活率提高到90％～100％，表明成功制造了小鼠感染模型。H9N2 AIV感染MDCK细胞的TCID50为10-4.5，感染细胞出现变圆、脱落、萎缩等病变现象，0.5mg/mL的利巴韦林对感染细胞的保护率为80.4％，表明成功制造了细胞感染模型。 通过感染小鼠进行肺指数试验对穿心莲内酯、白藜芦醇和黄芪多糖等多种中药单体成分进行了筛选，发现亚硫酸氢钠穿心莲内酯具有极显著抗H9N2 AIV活性(p＜0.01)。接着，利用流感病毒感染小鼠的肺炎模型，对穿心莲内酯及其几种衍生物(亚硫酸氢钠穿心莲内酯、炎琥宁和穿心莲内酯衍生物AL-1)体内的抗H9N2 AIV和H1N1 IFV活性进行了评价和比较。最后，利用流感病毒感染细胞模型，通过药物、病毒、细胞间的不同作用方式比较了穿心莲内酯及其衍生物抗H9N2 AIV的活性差异，探讨了穿心莲内酯及其衍生物的抗病毒作用机制。 小鼠感染试验：利用流感病毒感染小鼠模型，分别进行肺炎保护率试验和死亡保护率试验来评价穿心莲内酯及其衍生物的抗流感病毒活性。通过H9N2 AIV小鼠感染模型研究发现，穿心莲内酯及其衍生物对感染小鼠都有不同程度的保护作用。小鼠肺炎保护率试验结果表明，穿心莲内酯衍生物．AL-1 100mg/kg对感染小鼠肺炎有极显著抑制作用(p＜0.01)，抑制率为53.1％，超过阳性对照药物利巴韦林50.4％的肺指数抑制率；亚硫酸氢钠穿心莲内酯2000mg/kg和炎琥宁400mg/kg对感染小鼠肺炎有显著抑制作用(p＜0.05)，抑制率分别为25.5％和24.7％。小鼠死亡保护试验结果表明，穿心莲内酯衍生物AL-1 100mg/kg能极显著地保护感染小鼠(p＜0.01)，存活率和生命延长率分别为60.0％和88.9％；穿心莲内酯500mg/kg能显著地保护感染小鼠(p＜0.05)，存活率和生命延长率分别达到40.0％和49.2％。通过H1N1(FM1株)IFV小鼠感染模型研究发现，穿心莲内酯衍生物AL-1 50mg/kg能显著地保护感染小鼠(p＜0.05)，存活率和生命延长率分别为62.5％和41.3％。但穿心莲内酯、亚硫酸氢钠穿心莲内酯和炎琥宁对感染小鼠的肺指数、存活率及生命延长率均没有明显保护作用。 细胞感染试验：利用流感病毒感染细胞模型，通过先加药后接种病毒、先感染病毒后加药、感染病毒同时加药、药与病毒体外作用2h后接入等对MDCK细胞的四种处理方式，研究穿心莲内酯及其衍生物对H9N2 AIV的抑制作用，并据此推测其作用方式。试验结果表明，穿心莲内酯、亚硫酸氢钠穿心莲内酯、炎琥宁及穿心莲内酯衍生物AL-1在体外对H9N2 AIV均有直接的抑制作用(p＜0.01)，其中穿心莲内酯和亚硫酸氢钠穿心莲内酯对病毒增殖的多个环节均有抑制作用；炎琥宁可以抑制流感病毒的合成与释放。由于在细胞感染试验预防和治疗给药方式中，穿心莲内酯衍生物AL-1对细胞的保护作用比穿心莲内酯的效果差，但对感染流感病毒小鼠有很好的保护作用，推测穿心莲内酯衍生物AL-1在体内可能是其代谢物发挥抗病毒作用。 由上述各试验结果可得出，新型穿心莲内酯衍生物AL-1对感染流感和禽流感病毒小鼠均有显著保护作用，具有临床应用前景，值得进一步研究。