发酵饲料是以配合饲料或饲料原料为基料,利用益生菌功能菌株的代谢活动,人工控制发酵方式和发酵条件,生产出富含高活性益生菌及其功能性代谢产物的饲料。发酵饲料的开发为解决饲料端“禁抗”问题提供了可行的技术方案。本试验将实验室保存的益生菌菌株按照要求复配成发酵菌剂,对家禽配合饲料进行固态发酵。通过比较不同条件下发酵饲料的pH、酸溶蛋白/粗蛋白、抑菌活性指标,优化发酵条件。对蛋鸡进行饲喂,观察发酵饲料对蛋鸡的生产状况和蛋品质改善的影响,通过高通量测序分析饲喂发酵饲料蛋鸡肠道菌群多样性。试验结果如下:1.饲料的发酵质量受发酵方式和工艺条件的影响。本试验利用SPSS软件设计正交试验以饲料pH、酸溶蛋白/粗蛋白、抑菌活性为评价指标,对配合饲料的固态发酵条件进行了优化。结果表明,对饲料发酵质量影响的因素主次为:发酵温度>发酵时间>发酵含水量>发酵接种量。最终确定的优化发酵条件为:袋装嫌氧发酵方式、物料含水量40%、自然pH、接种量1.0×109CFU/kg、37℃下固体密闭嫌氧发酵14d。2.在发酵过程中,物料含水量由40%下降到36.64%;有效活菌数在前6 d保持持续增长,第6d达到最高2.93×109CFU/g,之后开始下降,到14d时含量为7.12×108 CFU/g;饲料pH在发酵前6d下降较快,之后下降减缓,到14 d时基本稳定在4.5左右;抑菌活性在发酵期间一直处于上升状态,前12d上升幅度较大,之后进入稳定期,14d时抑菌活性约为1.2u/g;发酵过程中乳酸、乙酸含量都在逐渐增加,乳酸在前7d含量上升趋势明显,之后变缓,发酵14d时含量为18.31mg/g,乙酸含量增加无明显波动,在14d时含量为4.35mg/g;酸溶蛋白含量从发酵第2d开始上升明显,发酵14d时含量为5.28%,酸溶蛋白/粗蛋白达到29.58%;发酵过程中纤维素酶活从第2d开始上升明显,蛋白酶活和淀粉酶活增加相对缓慢,14d后纤维素酶活为290.50 IU/g,蛋白酶活为28.66IU/g,淀粉酶活为2.61IU/g。3.将发酵14 d以上的配合饲料以15%的比例替代基础日粮,饲喂400日龄的产蛋鸡,试验期2个月。结果显示试验组蛋鸡较对照组生产效率显著提高,试验开始时试验绀与对照组蛋鸡的产蛋率无明显差别,试验结束时,试验组平均产蛋率由72.83%上升至75.56%,对照组平均产蛋率由72.73%下降到69.83%;试验组平均次蛋率由6.12%下降到5.86%,对照组平均次蛋率由6.21%上升到7.74%;试验组死淘率由0.36%下降到0.25%,而对照组死淘率由0.37%上升到0.44%:试验组蛋品质显著改善,平均哈氏单位为78.22,对照组的平均哈氏单位为61.72。4.检测两组试验蛋鸡的免疫因子,包括白蛋白、免疫球蛋白和一些组细胞因子。试验组蛋鸡白蛋白、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M含量均升高,尤其是机体抗病毒侵害的干扰素IFN-r含量提高10%左右,而白细胞介素-2、白细胞介素-6、TNF-α降低。试验组胸腺指数明显高于对照组,胰脏、脾脏指数两组差异不明显,而肝脏指数对照组要高于试验组。肠道绒毛切片观察显示,试验组回肠绒毛高度高于对照组,绒毛表面更光滑,隐窝更深。另外,试验组氮排泄率降低5.07%,磷排泄率降低2.03%。5.利用宏基因组高通量测序对试验蛋鸡肠道的菌群多样性进行分析。通过对比试验组和对照组肠道微生物菌群多样性发现,试验组OTU水平明显低于对照组。试验组的菌群丰度指数Ace、Chao1均低于对照组,Shannon指数试验组高于对照组,说明饲喂发酵饲料能够降低试验蛋鸡肠道菌群丰度和多样性。在门水平上,对蛋鸡健康有益的后壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)远高于其他菌门,属于优势菌群。在纲水平上的芽孢菌纲(Bacilli)和拟杆菌纲(Bacteroidia)合起来占主要部分,属于优势纲目。属水平上,乳杆菌菌属(Lactobacillus Beijerinck)和普氏杆菌属(Prevutella)百分含量最高。总的来说试验组对比对照组肠道菌增加了芽孢杆菌、乳杆菌、拟杆菌等益生菌含量,减少了有害菌如大肠杆菌(Escherichia coli)和链球菌(Streptococcus)等的含量。饲喂发酵饲料可改善蛋鸡肠道微环境。