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采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术，从猪胃组织中扩增得到Ghrelin基因，将其克隆到pMD18-T中，经双酶切初步鉴定后，将酶切下的目的基因进一步克隆到真核表达载体PCI中，进行序列测定，结果表明：插入载体PCI中的片段为含有目的基因的核苷酸序列，真核表达重组质粒PCI-Ghrelin-28aa构建成功；将构建的PCI-Ghrelin-28aa质粒以1mg／kg体重肌肉注射给18～20g昆明小鼠，观察25d内对其体重的影响，结果表明：注射5d后，实验组小鼠平均日增重高于对照组，且差异显著(P＜0.05)，尤其是注射10～15d增重最为明显；20～25d两组日增重无差异；0～25d，质粒组平均累积增重均高于盐水注射组；其中0～15d、0～20d、0～25d质粒组平均累积增重分别比盐水组高50.5％(P＜0.01)、37.2％(P＜0.01)、28.7％(P＜0.01)。根据文献报道的猪Ghrelin与GHRH基因序列，设计了含Ghrelin信号肽及Ghrelin与GHRH部分核苷酸序列及linker序列等，共233bp的基因序列，通过基因合成的方法获得基因片段，并将其连入克隆载体PUC57中，经双酶切将其克隆至PCI真核表达载体中后，经PCR、酶切和测序鉴定，证明融合猪Ghrelin和GHRH基因的真核表达载体PCI-Ghelin／GHRH构建成功；提取PCI-Ghrelin／GHRH质粒并体内转染小鼠腿部肌肉组织，观察25d内PCI-Ghrelin／GHRH质粒对小鼠体重的影响，结果表明：0～5d，PCI-Ghrelin／GHRH质粒组平均累积增重分别比PCI-Ghrelin-28aa组、盐水组高29.9％(P＜0.05)、67.3％(P＜0.01)；第10d后，PCI-Ghrelin／GHRH质粒组，有部分小鼠出现有增重减轻现象，甚至生长停滞甚至，直到第15d后，小鼠的生长又恢复正常。整个实验期，PCI-Ghrelin／GHRH质粒组对小鼠的累积增重要略低于生理盐水组，但无统计的显著差异，其中从15d后，PCI-Ghrelin-28aa组小鼠的累积增重均高于其他两组，且差异显著(P＜0.05)。以乳酸-乙醇酸共聚物为载体，采用复乳-液中蒸发法制备PCI-Ghrelin-28aa真核表达质粒微球，微球大小与文献报道相符，平均粒径分布在2-3微米间，测得的包封率为99.27％，载药量6.8μg／mg，回收率65.7％；将质粒微球肌肉注射给小鼠，并记录25d里小鼠的体重变化情况；体重统计结果表明，25 d时微球包裹质粒组累积增重比裸质粒组、生理盐水组分别高14.3％、27.9％(P＜0.05)。结论：构建的PCI-Ghrelin-28aa基因质粒对小鼠促生长作用明显，作用时间至少达20d，有望将其开发成为新的促猪生长的基因药物；构建的PCI-Ghrelin／GHRH质粒对小鼠有明显的增重效应，但时间极为短暂，分析原因可能是由于GHRH与Ghrelin在小鼠体内同时大量的表达，引起GH的迅速释放，并引起的机体本身的反馈调节，使SS也大量的释放，导致后期对小鼠的生长造成抑制。通过对PCI-Ghrelin-28aa质粒微球对小鼠的生长的观察，结论认为，载PCI-Ghrelin-28aa质粒微球具有缓释作用，并有增强质粒吸收及表达的趋势，其作用效果要优于直接注射裸质粒。