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高致病性禽流感（HPAI），如H5N1、H7N9目前已突破种间障碍直接威胁人类的健康。从天然药物中寻找高效低毒的先导化合物是研制和开发抗HPAI药物的一条有效途径。本研究活性筛选以A/Tiger/Harbin/01/2002（HAB/01）H5N1病毒感染的犬肾细胞为模型，通过细胞病变法进行初步活性评价筛选，首次发现宽叶缬草提取物具有显著的抗H5N1病毒的活性。本论文对宽叶缬草有效活性部位的化学成分进行深入研究，并对分离得到的单体进行细胞水平的抗H5N1活性评价，为抗禽流感药物的研制与开发奠定基础。本论文运用硅胶柱色谱、Sephadex LH20凝胶柱色谱、PHPLC和PTLC等方法进行分离纯化，从宽叶缬草根茎提取物中分离得到65个化合物，通过理化常数的测定，及MS、UV、IR、1D NMR1（H NMR13、C NMR）和2D NMR1（H1HCOSY、HSQC、HMBC、NOESY）等波谱数据分析，确定了其中60个化合物的结构，包括21个倍半萜类化合物Volvalerenal F（1）、Volvalerenal G（2）、Volvalerenic Acid F（3）、Volvalerenal H（4）、Volvalerenic Acid G（5）、VolvalerenalI（6）、Volvalerenal J（7）、Volvalerenal K（8）、Madolin A（12）、Volvalerenl A（14）、Volvalerenl C（30）、Volvalerenl B（42）、Madolin B（46）、Volvalerenal D（50）、Volvalerenic A（54）、Aromadendrane4α,10β diol（31）、15hydroxyspathulenol（32）、1hydroxy1,11,11decahydrocyclopropaneazulene10one（33）、4α,10α trimethyl epoxyaromadendrane（49）、Alloromadendrane4α,10β diol（51）和Volvalerenic acid D（52），3个单萜类化合物Densispicnins C（9）、p menth8ene1,2diol（36）和9hydroxyborneol（45），4个甾体类化合物β sitosterol（11）、豆甾烷3,7二酮（17）、3β Hydroxy5α,8αepidioxyergosta6,22diene（41）和豆甾醇（55），2个三萜类化合物熊果酸（34）和齐墩果酸（56），6个黄酮类化合物3,5二羟基7,4’二甲氧基黄酮（16）、山奈酚（39）、刺槐素（47）、1,7二羟基3,8二甲氧基呫吨酮（57）、槲皮素（58）和棉花皮素（59），4个蒽醌类化合物1,3二羟基蒽醌（19）、1,2二羟基蒽醌（20）、1,3,8三羟基6羟甲基蒽醌（37）和大黄素（48），5个木脂素类化合物NeojusticinA（13）、Justicidin A（18）、Pinoresino（l26）、Pinorespio（l40）和8hydroxypinoresinol（43），以及11个芳环衍生物，其中化合物19为新化合物，化合物13、16–20、32、36、37、41、45、47、51、57共13个为首次从缬草属植物中分离得到，化合物21、22、29、34、38、39、55、56、58–60共11个首次从该植物中分离得到。本研究所发现的新化合物均为萜类化合物，其中Volvalerenal F H（12、4）、Volvalerenal Acid F（3、5）为双环吉玛烷类倍半萜化合物，Volvalerenal I K（68）为香木兰烷类倍半萜化合物，Densispicnins C（9）为缩醛骨架的单萜类化合物，这些化合物进一步丰富了宽叶缬草及缬草属植物的天然产物的结构类型。倍半萜的极性较小，多为油状化合物，使用硅胶柱色谱，三氯甲烷甲醇系统进行洗脱，具有较好的分离效果。对双环吉玛烷类和香木兰烷类倍半萜化合物的波谱学特征进行了总结。这两种类型倍半萜分子结构中都含有一个三元环，因此存在着一对特征的环丙烷质子（H6，H7）。在香木兰烷类倍半萜中，这一对质子一般出现在δH00.6，双环吉玛烷类型倍半萜的环丙烷质子化学位移一般在δH0.91.9，H6一般为dd或t峰，H7一般裂分为ddd峰，但由于和其他碳上质子化学位移较近，一般不容易区分，尤其是H7质子。δH1.61.9（H6）化学位移一般大于δH0.81.0（H7）双环吉玛烷类一般在C1和C5位双键碳上含有烯氢质子信号。13在C NMR中，双环吉玛烷类型化合物一般的会有2个或4个双键碳信号，2个环丙烷甲基质子信号，或者在C1和C10位形成一个环氧三元环，化学位移会增加到，C1和C10化学位移会增加到60～70之间。香木兰烷类型化合物，有两个环丙烷甲基质子信号，一般不含碳碳双键，如没有取代，C1化学位移在δC55左右，C5化学位移在δC48左右。通过CPE法对分离得到的部分化合物进行体外抗H5N1病毒活性评价筛选，结果发现化合物X在药物浓度为9.4g/mL时，CPE结果为“++”，有较好的抗H5N1病毒活性，且有较好的剂量依赖关系，可能为宽叶缬草抗H5N1病毒的活性成分之一，该类型化合物具有进一步研究开发的潜力；另外山奈酚（39）在浓度为37.5g/mL时，CPE评价结果为“+++”，也具有一定的抗H5N1病毒活性。