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本试验以茶褐斑拟盘多毛孢[Pestalotiopsis guepinii (Desm.) Stey]和园林绿化常用的山茶品种七心红(Camellia pitardii)为试材,对茶褐斑拟盘多毛孢菌产生的致病相关因子——毒素和细胞壁降解酶进行了多方面的研究。筛选出了茶褐斑拟盘多毛孢产毒的最佳培养条件,并对粗毒素的理化性质作了进一步的研究;对茶褐斑拟盘多毛孢在活体内外产生的细胞壁降解酶种类、活性及其动态变化进行了测定,并对细胞壁降解酶的动力学特性进行了研究;通过毒素和细胞壁降解酶对山茶叶片各项生理生化指标的影响,探索了茶褐斑拟盘多毛孢对山茶的致病机理。主要研究结果如下:1.茶褐斑拟盘多毛孢在供试的液体培养基中可以产生对山茶有毒性作用的毒素,对茶褐斑拟盘多毛孢菌的产毒培养条件的研究表明,该病菌的最佳产毒培养基是Fries培养基,最佳产毒培养条件是:25℃、培养液初始pH5.0、连续光照、振荡培养15d。2.用Fries培养基在最佳培养条件下培养出的茶褐斑拟盘多毛孢菌滤液制备成粗毒素,通过检测证明此粗毒素具有较强的热稳定性;对pH敏感,耐酸碱能力较差,pH5.0时毒素致病活性最强;茶褐斑拟盘多毛孢粗毒素中具有生物活性的成分大多是极性较大的物质。3.茶褐斑拟盘多毛孢在活体内外均能产生一系列细胞壁降解酶,其中木聚糖酶、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、β-1,4—内切葡聚糖酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶在活体内外的活性都较高,在致病过程中这几种酶起着重要作用;而漆酶在活体内外的活性都很低,在致病过程中的作用较小。4.对木聚糖酶、PMG、Cx和β-葡萄糖苷酶的动力学特性研究表明,PMG和Cx酶活反应的最适温度为50℃,β-葡萄糖苷酶和木聚糖酶反应的最适温度为60℃;Cx、β-葡萄糖苷酶和木聚糖酶的最适pH均为5.0,PMG的最适pH为5.0-6.0,说明4种酶均倾向于弱酸性环境;Cx、PMG和木聚糖酶随着反应时间的延长酶活性下降,而β-葡萄糖苷酶活性随反应时间的延长先急剧升高后缓慢下降;4种细胞壁降解酶的最大反应速度从大到小依次为木聚糖酶、PMG、β-葡萄糖苷酶、Cx,它们和相应底物的亲和力由弱到强顺序为PMG、Cx、木聚糖酶、β-葡萄糖苷酶。5.生理生化测定表明,茶褐斑拟盘多毛孢的致病性是毒素和细胞壁降解酶协同作用的结果。毒素和酶协同作用对山茶膜系统的损伤最大,毒素对细胞膜的损伤次之,果胶酶、纤维素酶和木聚糖酶主要在病害扩展过程中起辅助作用;毒素在对山茶叶绿体的破坏中起主导作用;毒素和细胞壁降解酶均能在损伤小时诱导山茶抗性,使可溶性蛋白、可溶性糖含量及防御酶系(SOD、POD、PPO等)活性有所提高,但当机体组织被破坏后,山茶防御系统也被彻底破坏。