IL-22及LRRC16A基因单核苷酸多态性与痛风性关节炎的关系研究

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目的:1、研究白细胞介素22(interleukin-22,IL-22)在急性痛风性关节炎发病中的作用。2、初步探究LRRC16A基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与痛风性关节炎发病风险可能存在的关系。方法:1.用ELISA方法检测77例急性痛风性关节炎患者(Acute Gouty Arthritis,AGA)(男性68例,女性9例)和30例健康对照者(Healthy Controls,HC)(男性20例,女性10例)外周血IL-22浓度,记录急性痛风性关节炎患者性别、年龄、病程、BMI(Body Mass Index),并检测患者血糖、血清尿酸(uric acid,UA)、血清肌酐(Creatinine,Cr)、24小时尿尿酸水平、24小时尿肌酐水平、谷丙转氨酶(Alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(Aspertate Aminotransferase,AST)、胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,LDL-c)、高密度脂蛋白(High-density lipoprotein,HDL-c)、肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)以及超敏 C 反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,,hsCRP)和血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR),分析急性痛风性关节炎组与健康对照组外周血IL-22水平的差异及急性痛风性关节炎组外周血IL-22浓度与血清尿酸水平等各项临床指标的相关性。2.采用聚合酶链反应技术和一代基因测序技术对30例急性痛风性关节炎患者(AGA)(男性30例)和30例健康对照者(HC)(男性30例)的LRRC16A基因位点rs2149228和rs742132进行分析,初步分析LRRC16A基因位点rs2149228和rs742132与痛风发病风险的相关性。3.统计方法:所得计量资料使用K-S检验是否符合正态分布,以(mean±SD)表示均数加减标准差,两组间计量资料比较用t检验,多组间计量资料比较用方差分析,相关性分析采用Pearson直线相关分析法。采用拟和优度χ~2检验对基因型频数分布进行分析。结果:1.急性痛风性关节炎患者和健康对照者在年龄、性别上差异无统计学意义,两组具有可比性。痛风患者外周血IL-22浓度高于健康对照组,分别为(7.95±5.52)ng/L和(5.20±2.57)ng/L,两组间差距有统计学意义(t=-2.62,P=0.01见表2)。2.77例急性痛风性关节炎组外周血IL-22浓度水平与患者血糖、BMI、UA、Cr、eGFR、ALT、AST、总胆固醇、甘油三酯、LDL-c、HDL-c、24小时尿尿酸、24小时尿肌酐均无相关性(P>0.05见表3),77例急性痛风性关节炎组外周血IL-22浓度水平与hsCRP水平呈正相关,也与血沉水平呈正相关(P<0.05见表3)。3.用拟和优度χ~2检验对正常对照组的基因型频数分布进行分析。结果表明,LRRC16A基因rs2149228位点基因型的频数分布均符合Hardy.Weinberg平衡定律,具有群体代表性(P>0.05)。对LRRC16A基因rs2149228位点的基因型在痛风患者组和对照组间的比较,发现rs2149228位点AT基因型频率最高,AA型次之,TT型最低,在健康对照组中各基因型频率(AA,30%;AT,70%;TT,0%)与痛风组(AA,43.3%;AT,50%;TT,6.7%)比较,差异不具有统计学意义(P>0.05),A、T两等位基因频率在两组间差异也无统计学意义(P>0.05,见表4)。4.用拟和优度χ~2检验对正常对照组的基因型频数分布进行分析。结果表明,LRRC16A基因rs742132位点基因型的频数分布均符合Hardy.Weinberg平衡定律,具有群体代表性(P>0.05)。对LRRC16A基因rs742132位点的基因型在健康对照组的比较,发现rs742132位点AA基因型频率最高,AG型次之,未发现GG型,在痛风患者组和中,AA基因型与AG基因型的频率一致,在健康对照组中各基因型频率(AA,70%;AG,30%;GG,0)与痛风组(AA,50%;AG,50%;GG,0%)比较,差异不具有统计学意义(P>0.05),A、G两等位基因频率在两组间差异也无统计学意义(P>0.05,见表5)。结论:1.急性痛风性关节炎患者外周血IL-22浓度升高,并与ESR、hsCRP呈正相关,提示IL-22可能与急性痛风性关节炎发病相关。2.LRRC16A基因rs2149228位点的基因型在急性痛风性关节炎组和健康对照组中AT基因型频率最高,AA型次之,TT型最低,差异不具有统计学意义(P>0.05),A、T两等位基因频率在两组间差异也无统计学意义(P>0.05)。3.LRRC16A基因rs742132位点的基因型在急性痛风性关节炎组和健康对照组中差异不具有统计学意义(P>0.05)。健康对照组中AA基因型频率最高,AG型次之;在急性痛风性关节炎组,AA基因型与AG基因型的频率相等,两组均未发现GG型。A、G两等位基因频率在两组间差异也无统计学意义(P>0.05)。
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