文殊兰种子中生物碱的化学成分研究

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文殊兰(Crinum asiaticum L.)是多年生草本植物,隶属于石蒜科文殊兰属,其种子近球形,成熟时黄色,主要分布于中国南部。文殊兰全株味辛、苦、寒,有小毒。其全株含有多糖类、黄酮及其苷类、生物碱及其苷类、脂肪酸类、萜类、甾体类、微量元素和氨基酸类等多种化学成分。临床研究表明,其化学成分有清热解毒,祛瘀止痛之功效,主治热疮肿毒,淋巴结炎,咽喉炎,头痛,痹痛麻木,跌打瘀肿,骨折,毒蛇咬伤等。文殊兰鳞茎和叶中含有大量的生物活性成分,而其种子中具有生物活性的化学成分研究尚未报道。本课题拟以文殊兰成熟种子为原料,对其生物碱类成分进行提取分离并探讨其药理活性,为文殊兰的进一步开发和利用提供理论依据。本课题主要研究文殊兰种子中生物碱类化学成分,采用单因素方法及响应曲面法优化了最佳的提取方式及提取工艺,并按照最佳提取方式及工艺提取生物碱,采用酸水-碱化-萃取法进行除杂。采用CH2C12作为萃取溶剂,将得到的总生物碱浸膏利用多重色谱法进行分离纯化,将分离得到的化合物通过TLC检测,将薄层层析Rf值一致的样品组分合并,并采用HPLC法分别进行组分的纯度分析。在HPLC法中,选用C18色谱柱,以甲醇-水系统作为流动相,控制流速1.OmL/min,进行梯度洗脱。当化合物的色谱峰达到基线分离时,记录流动相比例,在此色谱条件下,将色谱峰较好的样品化合物采用HPLC半制备液相进行制备,控制流速4.0mL/min,继而分离得到单体化合物。最后,利用NMR及MS技术对化合物进行结构鉴定。本实验采用加热回流提取生物碱,并采用响应曲面法优化提取条件,结果为:提取时间2.5h、提取温度85℃、料液比1:9、乙醇的浓度为95%,此条件下生物碱的提取率为0.4494%。将获得的生物碱浸膏利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、HPLC分析及半制备液相等分离手段共得到3个单体化合物。根据所得化合物的理化性质,结合1H-NMR、13C-NMR、MS等光谱数据鉴定出3个化合物分别为(1)N-反式-阿魏酰基酪胺(N-trans-feruloyl tyramine),(2)甘草素(liquiritigenin),(3)朱顶红星碱(hippacine;4,5-etheno-9,10-dihydroxy-7-phenanthridone)。
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