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目的:探讨羟基喜树碱与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联用对肺腺癌A549细胞是否具有协同杀伤作用,并探讨羟基喜树碱是否影响细胞线粒体膜电位及Bcl-2、Bcl-xL表达。 方法:MTT法检测TRAIL(100ng/mL)、羟基喜树碱(4、40、400ug/mL)及TRAIL与羟基喜树碱联用的细胞毒性作用,PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,罗丹明123染色流式细胞仪检测线粒体膜电位,Western blot和免疫细胞化学分析Bcl-2、Bcl-xL蛋白水平变化。 结果: 单用100ng/mLTRAIL,4、40、400ug/mL羟基喜树碱对A549细胞杀伤率分别为13.9%、3.0%、23.4%和76.7%,联合用药的抑制率分别为43.6%、52.5%、83.1%。100ng/mLTRAIL与4ug/mL羟基喜树碱有协同作用。 TRAIL(100ng/mL)、羟基喜树碱(4ug/mL)两者单用与两者联合作用于A549细胞的24h凋亡率与MTT结果一致。 羟基喜树碱(4ug/mL)和TRAIL(100ng/mL)单用分别引起(32±6.15)%和(12.8±3.0)%细胞线粒体膜电位降低,联合用药引起(50.7±4.7)%降低。 Western blot和免疫细胞化学都显示羟基喜树碱(4ug/mL)作用24小时不影响Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达。 结论: 1.TRAIL和羟基喜树碱都可体外诱导A549细胞凋亡。低剂量羟基喜树碱与TRAIL主要通过凋亡途径协同杀伤A549细胞。 2.低剂量羟基喜树碱明显降低A549细胞线粒体膜电位,与TRAIL联用使膜电位降低更显著。线粒体膜电位降低可能参与了羟基喜树碱增加A549细胞对TRAIL敏感性的过程。 3.低剂量羟基喜树碱不引起A549细胞Bcl-2,Bcl-xL下调,可能有其它因素参与羟基喜树碱增加A549细胞对TRAIL敏感性的过程。