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目的：研究慢性三氧化二砷中毒大鼠睾丸支持细胞紧密连接超微结构和功能变化；检测紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludins、Claudin-11的mRNA表达,探讨三氧化二砷对血睾屏障中紧密连接的生殖功能损伤作用机制。方法：以灌胃方式分别给予大鼠双蒸水、0.375mg/kg、0.75mg/kg、1.5mg/kg的As2O316周后双侧睾丸作以下检测：1.常规H-E染色观察睾丸组织细胞形态学变化；2.硝酸镧块染电镜观察支持细胞紧密连接的超微结构；3.实时荧光定量PCR检测在对照组及各实验组大鼠睾丸组织中ZO-1、Occludins、Claudin-11基因的mRNA表达。结果：1.光镜下低剂量组睾丸组织形态与对照组比较变化不明显；中、高剂量组表现为睾丸间质间隙增宽,生精小管变形、萎缩,基膜不完整,各级生精细胞排列疏松,层数减少,支持细胞数目随染毒剂量递增而减少；2.电镜下对照组支持细胞胞体呈柱状或不规则状,胞质丰富,细胞核饱满,呈卵圆形或不规则形位于胞体一侧,核仁明显,支持细胞与生精细胞之间连接紧密；低剂量组与对照组比较变化不明显；中剂量组支持细胞内滑面内质网扩张,溶酶体增多,线粒体肿胀空泡化,支持细胞与精原细胞之间出现较多较大的空泡,与其它生精细胞间隙增大；高剂量组支持细胞滑面内质网广泛扩张,线粒体嵴断裂、溶解,胞质空泡化；支持细胞与基膜间出现间隙,与生精细胞间隙明显增大。3.硝酸镧块染电镜下可见对照组硝酸镧颗粒局部沉积于基膜,镧线只见于基底室,未通过紧密连接进入近腔室；低剂量组镧颗粒大部分沉积在基膜,部分镧颗粒突破支持细胞紧密连接进入近腔室并出现在初级精母细胞周围；中剂量组硝酸镧颗粒通过紧密连接进入近腔室并到达近腔侧,沉积在精子细胞周围,镧线明显；高剂量镧颗粒进入管腔,在细胞间隙、精子与支持细胞之间、精子尾部周围都可见镧颗粒沉积。4.实时荧光定量PCR检测与对照组比显示：0.375mg/kg As2O3使ZO-1和Occludins的mRNA表达量升高,但无统计学意义(P>0.05),使Claudin-11的mRNA表达量升高1.35倍(p<0.05)；0.75mg/kg As2O3使ZO-1、Occludins、Claudin-11的mRNA表达量分别下降1.51、1.25、1.36倍(p<0.05)；1.5mg/kg的As2O3使ZO-1的mRNA表达量下降1.71倍、Occludins下降1.94倍、Claudin-11下降2.65倍(p<0.01)。结论：1.慢性接触一定剂量As2O3(>0.75mg/kg)能引起大鼠睾丸支持细胞明显数量减少,紧密连接结构破坏,支持细胞与生精细胞连接松散、脱落而产生生殖毒性,且存在剂量-效应关系；2.慢性接触一定剂量As2O3(>0.75mg/kg)可以通过破坏紧密连接产生生殖毒性；3.慢性接触0.375mg/kg As2O3首先影响Claudin-11的基因mRNA表达；4.慢性接触一定剂量As2O3(>0.75mg/kg)的雄性生殖毒性机制之一可能是通过下调大鼠睾丸支持细胞紧密连接相关蛋白ZO-1、Occludins、Claudin-11的基因mRNA表达,相关蛋白合成减少,支持细胞结构及紧密连接破坏,产生生殖毒性；