【摘 要】
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根皮素属于黄酮类化合物,是芹菜素和柚皮素在人体肠道中被细菌消化分解的中间产物,同时广泛存在于苹果、梨等水果中。黄酮类化合物被认为在癌症发生、免疫反应、凝血等过程中
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根皮素属于黄酮类化合物,是芹菜素和柚皮素在人体肠道中被细菌消化分解的中间产物,同时广泛存在于苹果、梨等水果中。黄酮类化合物被认为在癌症发生、免疫反应、凝血等过程中发挥作用,其中根皮素作为葡萄糖糖转运蛋白GLUT2的拮抗剂,能有效抑制肠道对糖的吸收和肾脏对糖的重吸收,可以对癌症细胞产生饥饿效应。另外,根皮素是一种抗氧化剂,能抑制表皮油脂分泌和黑色素细胞活性,具有保湿、祛油、淡化色斑等功效,可作为化妆品原料,应用于面膜、乳霜、精华素等护肤产品中。本文鉴定的脓肿分枝杆菌中的碳—碳键水解酶mPhlG,与底物特异性较为清楚的第一个根皮素水解酶Phy一样,也具有水解三羟基苯乙酮的活性。通过分子置换的方法,我们解析了mPhlG的高分辨晶体结构,分辨率达到1.83A.晶体结构一个非对称单位中有两个亚基,同时通过化学交联验证了蛋白在溶液状态下为二体。His133, Glu164, His269, E273围绕一个金属离子和一个水分子构成活性口袋,另外,基于分子对接模型,His118, Tyr125, His217, Tyr232可能与三羟基苯乙酮环上的羟基形成氢键作用用于固定底物。突变体酶活结果显示,这些残基突变后,酶活明显下降,其中His133Ala和His217Ala两个突变体完全丧失了对根皮素的水解活性。
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