小麦（Triticum aestivum L.）是重要的粮食作物之一。盐胁迫是一种重要的非生物胁迫,极大地威胁着世界各地的作物产量和粮食供应。因此,在生理和分子水平开展小麦抗盐机理研究具有重要意义。本文首先对5种不同的小麦品种进行耐盐筛选,筛选出耐盐品种青麦7号（Q7）,科农199（K199）是盐敏感品种。随后对二者在盐处理前后的根及叶片进行转录组测序和分析,筛选出并克隆了一个小麦耐盐相关基因TaGF14b,并对其功能进行初步研究,结果如下:1.筛选出耐盐小麦品种Q7,并验证其耐盐的生理机制对Q7和K199分别进行0（对照）和150 m M的Na Cl处理。与对照相比,盐处理后,Q7和K199的生物量下降、Na+和MDA含量升高,K+含量、光合速率、叶绿素含量降低,但盐处理后上述指标在Q7中下降或升高的程度低于K199。由此看出,Q7比K199耐盐。2.Q7与K199盐处理前后的转录组数据分析得到了Q7和K199在盐处理前后根和叶片的转录组数据,通过对基因功能注释、GO功能分类和KEGG代谢通路分析,从活性氧清除、激素调控、离子转运、转录因子表达和光合作用五种代谢途径中,探究盐处理下Q7与K199相关基因的表达差异。与K199相比,Q7中这五种代谢途径中的一些关键基因,如GSTs、GPX、POD、PP2C、PYR、SAUR、SOS、HAK、NHX、MYB、WRKY、NAC、b HLH和AP2/ERF等相关基因在处理后显著上调,表达量更高。结合相关生理数据分析,表明Q7在活性氧清除、离子转运、转录因子和光合作用等方面比K199具有更强的应对盐胁迫的能力。3.小麦TaGF14b基因克隆及生物信息学分析根据TaGF14b在Q7根和叶片中盐处理后的高表达量,及14-3-3蛋白与耐盐途径复杂且多样的联系,选定小麦TaGF14b基因作为探究Q7耐盐分子机制的基因之一。克隆得到小麦TaG14b基因CDS序列,全长789 bp,编码263个氨基酸。对TaG14b基因及编码氨基酸序列进行生物信息学预测分析,Ex PASy网站分析显示TaG14b蛋白呈亲水性;Signal P-5.0分析显示TaG14b没有信号肽;TMHMM分析显示TaG14b顶端没有跨膜螺旋结构;TaG14b与二粒小麦的14-3-3相似蛋白GF-14B及硬粒小麦的一个未命名蛋白有较高同源性,由于这两个蛋白均为推定的14-3-3蛋白家族成员,推测TaG14b也属于14-3-3蛋白家族成员。4.小麦TaGF14b基因过表达株系筛选鉴定为了研究TaGF14b在小麦耐盐中的作用,构建TaGF14b过表达载体p CAMBIA3300-UBI-TaGF14b,利用农杆菌转化的方法转化小麦,获得转基因株系。通过PCR对农杆菌转化后获得的小麦幼苗进行鉴定。结果表明,47株转基因小麦幼苗中,有38株为转TaGF14b基因小麦,随后利用荧光定量PCR对这些小麦中TaGF14b的表达量进行测定,并挑选TaGF14b表达量明显上升的小麦进行后续耐盐鉴定实验。