[目的]　　 1.探索同种异基因小鼠骨髓移植移植物抗宿主免疫排斥反应(GVHD)动物模型的建立方法，优化各种实验条件，建立稳定、典型的移植物抗宿主免疫排斥反应动物模型，为骨髓移植GVHD的研究提供更好的技术平台。　　 2.建立同种小鼠气管移植排斥反应动物模型，为探讨肺移植排斥反应机制提供技术平台。　　 3.探讨新型抗肿瘤药物乙酰肝素酶抑制剂(OGT2115)在气管移植后管腔纤维化闭塞发生中的作用，为降低气管移植排斥反应，提高肺移植成功率提供新的防治措施。　　 [方法]　　 1.取C57BL/6雄性供鼠的脾细胞及骨髓细胞，将其按骨髓细胞/脾细胞=1∶1、骨髓细胞/脾细胞=1∶2的比例配制成相应的细胞悬液，单纯骨髓细胞悬液作对照，通过尾静脉注射的方法将不同比例骨髓细胞/脾细胞悬液和单纯骨髓细胞悬液分别注射入BALB/c骨髓移植雌性受鼠体内，设立不注射细胞悬液的空白对照组。移植后每两天对受鼠毛发改变、精神状态、体重、背部改变等GVHD的典型症状及开始出现的时间进行详细观察，并检测受鼠嵌合体形成及肝、肺和小肠的病理改变。　　 2.取清洁级BALB/c雄鼠作为气管移植受者，C57BL/6雄鼠作为供者。模型建立实验分2组:同系对照组和异系移植组。同系对照组，将BALB/c雄性供鼠8个软骨环长度的气管移植同系雄性受鼠颈背部皮下“遂道”;异系移植组，将BALB/c雄性供鼠8个软骨环长度的气管移植至C57BL/6雄性受鼠颈背部皮下，每组移植6个气管，每只受鼠接受2个移植气管。术后放入清洁级动物房饲养4周，取出移植气管，检测移植物的病理改变。　　 3.将C57BL/6雄性受鼠随即均分为对照组和实验组，实验组于移植手术前4小时第一次腹腔注射OGT2115，随后每周注射3次。取BALB/c雄性供鼠8个软骨环长度的气管作为移植物，移植入受鼠颈背部皮下“遂道”，每只受鼠移植入2个气管。4周后取出移植物和受鼠肝脏组织，进行HE染色，观察移植物和肝脏的病理改变，分析OGT2115对气管移植后气管管腔纤维化闭塞的影响。　　 [结果]　　 1.骨髓移植后移植物抗宿主免疫排斥反应(GVHD)动物模型的建立　　 在骨髓移植2周左右受鼠出现了弓背、颈部脱毛、肛门红肿、腹泻等较典型的GVHD症状;BMC/SC=1∶2组受鼠平均生存时间为11天，BMC/SC=1∶1组受鼠平均生存时间15天，有2只一直存活至第5周;BMC/SC=1∶2组的受鼠GVHD症状较1∶1组更明显更典型，但几乎全部于移植后2周内死亡;移植后第5周从濒死受鼠外周血白细胞提取DNA，PCR法成功检测到了雄性供鼠180bp的SRY嵌合体条带。HE染色结果显示受鼠肝脏、肺及小肠均出现淋巴细胞浸润现象。　　 2.同种小鼠气管移植动物模型的建立　　 术后4周移植气管HE染色结果显示同系对照组气管腔仅见少量粘液，未出现纤维化闭塞及成纤维细胞增生，而异系移植组气管均出现了管腔的纤维化闭塞及成纤维细胞增生，但移植气管均未出现感染情况，说明小鼠颈背部气管移植适合于建立同种气管移植动物模型。　　 3.乙酰肝素酶抑制剂OGT2115对同种气管移排斥反应的影响　　 HE染色结果显示OGT2115注射组在气管移植后第4周均未出现管腔闭塞现象，亦无纤维化增生，而对照组全部出现管腔闭塞和纤维化增生，说明OGT2115对气管移植后的管腔纤维化堵塞有较强的抑制作用，病理检查显示OGT2115注射组受鼠肝脏亦无明显的病理改变。　　 [结论]　　 1.本研究成功制备了骨髓移植GVHD小鼠模型，并发现合适的脾细胞数量及其与骨髓细胞的比例是成功建立骨髓移植GVHD动物模型的关键因素之一。　　 2.本实验成功建立了同种小鼠颈背部气管异位移植动物模型，为肺移植的进一步研究奠定了基础。　　 3.OGT2115对移植气管腔发生闭塞性脉管炎及纤维化阻塞有较强抑制作用，且对肝脏无明显的毒性作用，OGT2115在肺移植中将具有较好应用前景。